Anticorpo monoclonale Anti-MUC1-C per WB, IHC-P, ELISA - P15941

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della MUC1

• La Mucina-1 (MUC1) è una glicoproteina transmembrana di grandi dimensioni, nota anche come antigene associato al carcinoma mammario DF3, antigene tumorale 15-3 (CA 15-3), episialina e mucina epiteliale polimorfa (PEM). Subisce una scissione autocatalitica in subunità alfa e beta.
• La subunità alfa possiede proprietà adesive cellulari e può agire sia come molecola di adesione che come anti-adesione, fornendo potenzialmente uno strato protettivo sulle cellule epiteliali contro l'attacco di batteri ed enzimi.
• La subunità beta contiene un dominio C-terminale coinvolto nella segnalazione cellulare, che modula vie di trasduzione come ERK, SRC e NF-kappa-B e promuove la progressione tumorale.
• Nelle cellule T attivate, la MUC1 influisce sulla via Ras/MAPK e regola la trascrizione mediata da TP53 legandosi, insieme a KLF4, all'elemento promotore PE21 di TP53, reprimendo così l'attività di TP53 e determinando il destino cellulare nella risposta a stress genotossico.
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana cellulare apicale, le forme secretate, il citoplasma e il nucleo, riflettendo le sue funzioni di scissione e segnalazione.
• Espressione tissutale: espressa costitutivamente sulla superficie apicale delle cellule epiteliali delle vie aeree, della mammella e dell'utero; è espressa anche nelle cellule T attivate e non attivate. È sovraespressa nei tumori epiteliali come il cancro della mammella e dell'ovaio, e l'isoforma Y è espressa esclusivamente nelle cellule tumorali.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono un'estesa glicosilazione legata a N e O, fosforilazione e palmitoilazione, che contribuiscono alla sua diversità strutturale e di segnalazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio citoplasmatico C-terminale (amminoacidi 1156–1255), quindi l'anticorpo riconosce la subunità beta della MUC1 (MUC1-C) e può rilevare sia la forma full-length che quelle scisse.
• Per il WB, tenere conto che il peso molecolare previsto è 122 kDa, ma a causa dell'intensa glicosilazione e della scissione proteica la banda osservata può comparire a pesi molecolari maggiori o sotto forma di bande multiple; si consigliano condizioni riducenti e una percentuale di gel appropriata (ad esempio 6–8%).
• Per IHC-P, può essere necessario il recupero dell'antigene (ad esempio, recupero epitopico indotto da calore in tampone citrato); convalidare su tessuti noti per essere positivi come il carcinoma mammario o ovarico.
• Per ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di coating e dell'anticorpo utilizzando MUC1-C ricombinante o lisati cellulari; la reattività crociata con mouse e ratto consente studi traslazionali.

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