Anticorpo policlonale anti-MyD88 per WB, IF/ICC, ELISA - Q99836

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MyD88

• MyD88 agisce come adattatore centrale nella segnalazione dei recettori Toll-like (TLR) e dei recettori dell'interleuchina-1 (IL-1R), avviando le risposte immunitarie innate.
  Riferimenti correlati:
  PMID:15361868
  PMID:18292575
  PMID:33718825
• In seguito all'attivazione, MyD88 si associa a IRAK1, IRAK2, IRF7 e TRAF6, inducendo l'attivazione a valle di NF-kappa-B e la produzione di citochine.
  Riferimenti correlati:
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  PMID:19506249
  PMID:24316379
• MyD88 aumenta la trascrizione di IL-8, contribuendo alle risposte pro-infiammatorie.
  Riferimenti correlati:
  PMID:9013863
• MyD88 partecipa alla cascata di segnalazione di IL-18 e attiva IRF1, promuovendo l'espressione di IFN-beta, NOS2 e IL12A per la difesa antivirale.
• In seguito all'attivazione di TLR8 da parte di RNA virale ricco di GU (ad esempio, proveniente da SARS-CoV-2 e HIV-1), MyD88 promuove il rilascio di IL-1beta mediato dall'inflammasoma NLRP3.
  Riferimenti correlati:
  PMID:33718825
• La segnalazione di MyD88 nelle cellule epiteliali intestinali mantiene l'omeostasi intestinale e controlla l'espressione della lectina antimicrobica REG3G.
• MyD88 si localizza sia nel citoplasma sia nel nucleo, in accordo con i suoi ruoli nella segnalazione e nella regolazione.
• MyD88 è una fosfoproteina soggetta a ubiquitinazione e lo splicing alternativo produce molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Nel Western blot (WB), MyD88 migra a un peso molecolare previsto di circa 33 kDa. Includere controlli positivi e negativi e valutare l'uso di GAPDH o β-actina come controlli di caricamento.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), validare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché MyD88 può essere citoplasmatico, nucleare o presente in entrambi i compartimenti a seconda dello stato di attivazione. La co-colorazione con marcatori degli organelli può aiutare a confermarne la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, il blocco con il peptide corrispondente all'immunogeno può aiutare a verificare la specificità. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione per la matrice del campione in esame.
• Poiché l'immunogeno (a.a. 20-140) copre la regione N-terminale, questo anticorpo policlonale può rilevare molteplici varianti di splicing se gli epitopi sono conservati. Verificare l'allineamento delle sequenze per la specie e le isoforme di interesse.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce la presenza di epitopi conservati; validare nel sistema modello pertinente utilizzando lisati di tessuti o cellule appropriati.

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