Anti-Mieloperossidasi (MPO) mAb di Coniglio per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05164

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Mieloperossidasi (MPO)

• La mieloperossidasi è una proteina eme contenente ferro espressa specificamente nei neutrofili e nei monociti. Viene sintetizzata come precursore e processata in catene leggere e pesanti.
• Funzioni nella formazione delle trappole extracellulari dei neutrofili (NET): si transloca al nucleo, si lega ai nucleosomi e guida la decondensazione della cromatina e l'estrusione del DNA, intrappolando i patogeni. Riferimenti correlati: PMID:40963017
• Agisce come perossidasi per produrre acido ipocloroso (HOCl) e altri acidi ipalogenosi (HOBr, HOI, HOSCN) in presenza di H₂O₂, potenziando così l'attività microbicida. Riferimenti correlati: PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335, PMID:1318692
• Catalizza l'ossidazione del nitrito in radicale diossido di azoto e genera specie reattive che clorurano e nitrano i residui proteici (es. APOA1), compromettendo il trasporto del colesterolo. Riferimenti correlati: PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756, PMID:15314690, PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• Ossida la melatonina e l'urato, agisce come ossidasi del monossido di azoto regolando il tono vascolare e cliva l'alfa-1-microglobulina per produrre una forma che inibisce l'ossidazione delle LDL. Riferimenti correlati: PMID:15636586, PMID:16148002, PMID:21266577, PMID:12089442, PMID:25698971
• L'attività perossidasica è inibita dall'inibitore della perossidasi di S.aureus SPIN, che blocca l'accesso del substrato all'eme catalitico.
• Si localizza principalmente ai lisosomi e ai granuli citoplasmatici nei neutrofili; dopo l'attivazione, viene secreta o translocata al nucleo e può associarsi ai cromosomi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per WB, il peso molecolare previsto è 84 kDa; validare con appropriati controlli positivi come lisati di neutrofili o monociti. Confermare il pattern di bande previsto tenendo conto del precursore e delle catene processate.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene; ottimizzare utilizzando sezioni FFPE da tessuti ricchi di neutrofili, es. midollo osseo o tessuto infiammato.
• Per IF/ICC, considerare protocolli di permeabilizzazione per accedere alla MPO granulare intracellulare e nucleare; utilizzare un blocco appropriato per ridurre il legame non specifico.
• Includere appropriati controlli negativi e considerare il test della reattività incrociata in campioni di topo e ratto, come indicato.
• Le prestazioni ELISA devono essere validate con MPO ricombinante o proteina nativa in fluidi biologici rilevanti.

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