Anticorpo policlonale di coniglio contro la mieloperossidasi (MPO) per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della mieloperossidasi (MPO)

• La MPO è una perossidasi contenente eme che svolge un ruolo fondamentale nel sistema immunitario innato, espressa principalmente nei neutrofili e nei monociti.
• Media la formazione delle trappole extracellulari dei neutrofili (NET) traslocando nel nucleo, legandosi ai nucleosomi e induciendo la decondensazione della cromatina e l'apertura del DNA in modo indipendente dall'ATP. Riferimenti correlati: PMID:40963017
• Come perossidasi, la MPO catalizza la produzione di acido ipocloroso (HOCl), acido ipobromo e altri ossidanti reattivi dal perossido di idrogeno, essenziali per l'attività microbicida contro un'ampia gamma di patogeni. Riferimenti correlati: PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335
• La MPO ossida anche il nitrito in radicale di diossido di azoto, contribuendo alla nitrazione delle proteine e alla modulazione della segnalazione infiammatoria. Riferimenti correlati: PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756
• L'enzima si localizza nei granuli azurofili (lisosomi) dei neutrofili e viene rilasciato nel fagosoma o all'esterno della cellula dopo la degranulazione; è stato rilevato anche nel nucleo e sui cromosomi.
• Le modifiche post-traduzionali includono il legame con l'eme, la coordinazione del calcio e la glicosilazione N-linked; la proteina matura è un tetramero composto da due catene leggere e due catene pesanti derivate da un singolo precursore.
• La MPO può clorare e nitrare l'apolipoproteina A-I (APOA1), compromettendo l'efflusso del colesterolo e contribuendo potenzialmente all'aterosclerosi. Riferimenti correlati: PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• L'attività perossidasica può essere inibita dalla proteina SPIN di S.aureus, che rappresenta una strategia di evasione immunitaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla porzione C-terminale della catena pesante della MPO (amminoacidi 606–745), che può bersagliare una regione conservata tra le specie, in linea con la reattività crociata riportata con topo e ratto.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto della MPO è di circa 84 kDa (precursore) o 59 kDa (catena pesante) e 13,5 kDa (catena leggera) dopo il processamento; si consiglia di ottimizzare la preparazione del campione per rilevare sia la forma precursore che quella matura.
• Nell'immunohistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF-P), validare l'anticorpo in sistemi di tessuti o cellule rilevanti, come il tessuto infiammato ricco di neutrofili o le cellule del sangue isolate, per confermare la colorazione specifica.
• Eseguire controlli appropriati (ad esempio controllo isotipo, blocco peptidico) e titolare le concentrazioni dell'anticorpo per ogni applicazione per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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