Anticorpo policlonale Anti-MYH13 per WB, IF-P, ELISA - Q9UKX3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Miosina-13

• Miosina-13, nota anche come MyHC-eo o MyHC-IIL, è una catena pesante della miosina a contrazione rapida espressa prevalentemente in specifici muscoli striati.
• Media le contrazioni ad alta velocità e bassa tensione, permettendo movimenti rapidi nei muscoli extraoculari e laringei.
• La proteina si localizza nel citoplasma come componente del filamento spesso delle miofibrille, dove interagisce con l'actina e l'ATP per generare forza meccanica.
• La specificità tissutale è limitata ai muscoli extraoculari e laringei, come identificato dalla profilazione di trascritti e proteine.
• Le caratteristiche chiave includono un dominio motore N-terminale con siti di legame per actina e ATP, una regione del collo con motivi IQ che legano la calmodulina e un dominio a bastone elicoidale avvolto C-terminale per la dimerizzazione.
• Modifiche post-traduzionali come la metilazione sono state rilevate tramite proteomica e potenzialmente modulano le interazioni o la stabilità della proteina.
• La massa molecolare prevista è di circa 224 kDa, in linea con l'annotazione UniProt (223,6 kDa).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre i residui 1240–1320 nel dominio a bastone elicoidale avvolto C-terminale; gli anticorpi policlonali possono anche riconoscere isoforme di splicing o miosine correlate: convalidare la specificità utilizzando lisati positivi per MYH13 (ad esempio, muscolo extraoculare).
• Per il Western blot, utilizzare gel di SDS-PAGE al 6–8% e prolungare il trasferimento (ad esempio, durante la notte a bassa tensione) per trasferire in modo efficiente la proteina di ~224 kDa; includere un marcatore di alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), considerare la colorazione simultanea con un marcatore sarcomerico (ad esempio, α-attinina) per confermare la localizzazione nelle miofibrille in sezioni di tessuto di topo o ratto, dato che è indicata la reazione crociata.
• Le prestazioni dell'ELISA devono essere valutate utilizzando l'immunogeno ricombinante come controllo positivo; a causa dell'espressione limitata, i lisati di tessuto nativo possono richiedere un'ottimizzazione della sensibilità.

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