Anticorpo policlonale coniglio anti-NAE1 per WB e ELISA - Q13564

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NAE1

• NAE1 è la subunità regolatrice dell'enzima attivante NEDD8 E1 dimero (UBA3-NAE1), che inizializza la cascata di neddilazione.
• Attiva NEDD8 adenilando la sua glicina C-terminale con ATP, quindi forma un intermedio NEDD8-UBA3 legato a tioestere prima di trasferire NEDD8 all'enzima E2 UBE UBE2M.
• La proteina è essenziale per la progressione del ciclo cellulare, in particolare al punto di controllo S-M, e la sua sovraespressione può innescare l'apoptosi tramite neddilazione deregolata.
• La neddilazione, l'attacco covalente di NEDD8 alle proteine bersaglio, regola la crescita cellulare, la vitalità e lo sviluppo.
• NAE1 è localizzato alla membrana cellulare e la sua espressione è ubiquitaria nei tessuti fetali e in tutto il cervello adulto.
• Splicing alternativo, acetilazione e varianti associate alla malattia (es. disabilità intellettiva) sono state riportate per NAE1.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 60 kDa (UniProt: 60246 Da; osservato ~60 kDa).
• Nota anche come APP-BP1 (proteina 1 legante il precursore della proteina amiloide beta), è stata originariamente identificata come partner di interazione del precursore della proteina amiloide.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi N-terminali 1-220 di NAE1 umano; questa regione è probabilmente esposta sulla superficie e adatta per generare anticorpi che riconoscono la proteina nativa.
• Per Western blot (WB), la dimensione della banda prevista è ~60 kDa; considerare l'uso di controlli appropriati (es. lisati da cellule con espressione NAE1 nota) e convalidare la reattività crociata in campioni di topo e ratto.
• Per ELISA, l'anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento; titolare per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Dato che NAE1 è coinvolto nella neddilazione, l'anticorpo può essere utile per studiare la dinamica della neddilazione proteica, ma confermare la specificità con esperimenti di knockdown/sovraespressione.

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