Anticorpo monoclonale Anti-Nanog per WB, IF-P, ELISA - Q9H9S0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della proteina homeobox NANOG

• NANOG (Homeobox protein NANOG) è un regolatore della trascrizione essenziale per la proliferazione e l'auto-rinnovamento della massa cellulare interna e delle cellule staminali embrionali. Conferisce pluripotenza alle cellule ES e previene la differenziazione verso i lignaggi dell'endoderma extraembriologico e del trofoblasto.
• Agisce come attivatore o repressore trascrizionale, legandosi in modo ottimale alle sequenze consenso del DNA 5'-TAAT[GT][GT]-3' o 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3'. Si lega al promotore POU5F1/OCT4 (PubMed:25825768). Riferimenti correlati: PMID:25825768
• Blocca la differenziazione del mesoderma indotta da BMP interagendo fisicamente con SMAD1, interferendo con il reclutamento di coattivatori nei complessi trascrizionali SMAD.
• Se sovraespresso, promuove l'ingresso delle cellule nella fase S e la proliferazione.
• Contiene un dominio homeobox di legame al DNA e un dominio di transattivazione C-terminale; la proteina ha un peso molecolare di ~34,6 kDa (sequenza canonica).
• Si localizza principalmente nel nucleo (LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE: Nucleo).
• L'espressione tissutale è limitata a carcinoma testicolare, tumori delle cellule germinali, gonadi fetali, ovaio e testicolo; non viene rilevata in molti organi somatici e negli ovociti (SPECIFICITÀ TISSUTALE).
• Parole chiave: splicing alternativo, proteina dello sviluppo, legame al DNA, homeobox, nucleo, proteoma di riferimento, ripetizione, repressore, trascrizione, regolazione della trascrizione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 153-305) copre parte del dominio di transattivazione e può riconoscere sia le isoforme full-length che quelle ottenute da splicing alternativo. Validare la rilevazione delle isoforme nel vostro sistema sperimentale.
• La dimensione attesa della banda nel Western blotting è ~35 kDa. Utilizzare buffer di lisi appropriati per estratti nucleari per garantire una rilevazione efficiente.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF), aspettarsi un pattern di colorazione nucleare; utilizzare un contrasto con DAPI per confermare la localizzazione.
• L'anticorpo è validato per ELISA; valutare formati ELISA diretti o sandwich per la rilevazione quantitativa di Nanog in lisati di cellule staminali.

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