Anticorpo policlonale di coniglio anti-NANOG per WB, ELISA - Q80Z64

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NANOG

• La proteina homeobox NANOG, nota anche come proteina 4 associata alle cellule ES, è un regolatore trascrizionale fondamentale per la proliferazione e l'autorinnovamento della massa cellulare interna e delle cellule staminali embrionali (ES). Riferimenti correlati: PMID:25825768
• Induce la pluripotenza nelle cellule ES e impedisce la loro differenziazione verso le linee cellulari dell'endoderma extraembrionale e del trofectoderma.
• Blocca la differenziazione mesodermica delle cellule ES indotta dalla proteina morfogenetica ossea interagendo fisicamente con SMAD1 e interferendo con il reclutamento di coattivatori.
• Si lega in modo ottimale alla sequenza consenso del DNA 5'-TAAT[GT][GT]-3' o 5'-[CG][GA][CG]C[GC]ATTAN[GC]-3' e può agire sia come attivatore sia come repressore trascrizionale.
• È in grado di autoreprimere la propria espressione nelle cellule ES in differenziamento legandosi al proprio promotore in seguito all'interazione con ZNF281/ZFP281, determinando il reclutamento del complesso NuRD.
• Si localizza nel nucleo e, a livello proteico, non viene espresso in molti organi somatici, ovociti, spermatogoni o linee cellulari ematopoietiche.
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme e la proteina presenta un dominio di legame al DNA homeobox; le parole chiave associate includono proteina dello sviluppo, attivatore, repressore e legame al DNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 160-305 di NANOG di topo, una regione che può contribuire alla cross-reattività umana osservata; si consiglia di considerare l'allineamento delle sequenze tra NANOG di topo e umano per valutare la conservazione dell'epitopo.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 34 kDa; includere controlli positivi appropriati, come lisati di cellule staminali embrionali di topo, e validare la specificità del rilevamento utilizzando campioni sottoposti a knockdown o knockout, se disponibili.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare la proteina NANOG ricombinante o estratti cellulari come antigeni di rivestimento e determinare empiricamente le diluizioni ottimali dell'anticorpo; la cross-reattività con NANOG umano consente un potenziale utilizzo nei test su campioni umani previa opportuna validazione.

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