Anticorpo policlonale di coniglio anti-NANP per WB ed ELISA - Q8TBE9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della NANP

• NANP (C20orf147) codifica la N-acilneuraminato-9-fosfatasi, nota anche come HDHD4 (proteina 4 contenente il dominio idrolasico simile all'alodealogenasi) e Neu5Ac-9-Pasi.
• È un membro della superfamiglia di idrolasi delle alodealogenasi (HAD) e presenta un caratteristico dominio idrolasico simile a quello delle alodealogenasi.
• L'enzima catalizza la defosforilazione dell'N-acetilneuraminato 9-fosfato (Neu5Ac-9-P) per generare l'acido N-acetilneuraminico (acido sialico), una fase chiave nella biosintesi degli acidi sialici. Riferimenti correlati: PMID:14235556 | PMID:16237198 | PMID:23747226
• Può inoltre riconoscere e defosforilare l'N-glicolilneuraminato 9-fosfato come substrato. Riferimenti correlati: PMID:14235556
• Gli studi funzionali e le annotazioni basate su parole chiave indicano un meccanismo catalitico dipendente dal magnesio.
• Il peso molecolare previsto dalla sequenza primaria è di circa 27,8 kDa, in accordo con la banda osservata sperimentalmente a 28 kDa negli immunoblot.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è costituito dalla NANP umana ricombinante a lunghezza intera (aa 1-248), suggerendo che l'anticorpo policlonale riconosca molteplici epitopi distribuiti sull'intera proteina.
• Per il Western blot, si consiglia uno screening iniziale con diluizioni comprese tra 1:500 e 1:2.000, utilizzando lisati cellulari totali di tessuti umani, murini o di ratto. Confermare la specificità preincubando l'anticorpo con l'immunogeno.
• Nell'ELISA, la natura policlonale può fornire un segnale robusto; se si sospetta una reattività crociata con altri membri della famiglia HAD, la purificazione con proteina A o le fasi di cross-adsorbimento possono contribuire a ridurre il fondo.
• Conservare l'anticorpo a −20 °C in piccole aliquote di lavoro per evitare cicli di congelamento e scongelamento; per la conservazione a lungo termine, considerare −80 °C, come raccomandato per gli anticorpi policlonali.

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