Anticorpo monoclonale coniglio anti-NAT1 per IF/ICC, ELISA - P18440

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NAT1

• NAT1 (Aminil N-acetiltransferasi arilica 1) è un enzima metabolizzante di xenobiotici di fase II che acetila amine aromatiche e idrazine, svolgendo un ruolo critico nella disintossicazione dei farmaci.
• Catalizza sia l'N-acetilazione (disintossicazione) che l'O-acetilazione (bioattivazione) dei substrati, essendo quindi in grado di attivare certi procancerogeni.
• NAT1 è un enzima monomorfo espresso in vari tessuti, a differenza della sua controparte polimorfa NAT2; è noto anche come AAC1, MNAT, NAT-1 e NATI.
• La proteina si localizza nel citoplasma, dove esercita la sua attività acetiltransferasi, come annotato dalle parole chiave "Citoplasma" e "Transferasi".
• L'acetilazione è una chiave modifica post-traduzionale che può regolare la funzione e la stabilità di NAT1.
• Il peso molecolare teorico di NAT1 umano è di circa 33,9 kDa, con una banda osservata spesso rilevata intorno a 34 kDa nel Western blotting (sebbene questo anticorpo non sia convalidato per WB, il peso proteico corrisponde alla specifica del prodotto).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno mira alla regione N-terminale (aminoacidi 1-100) di NAT1 umano; convalidare la reattività crociata con ortologhi di mouse e ratto sperimentalmente, poiché l'omologia di sequenza può variare.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), permeabilizzare le cellule con Triton X-100 al 0,1–0,2% o saponina per consentire all'anticorpo l'accesso al NAT1 citoplasmatico.
• Nell'ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo monoclonale con un anticorpo di rilevamento specifico per un epitopo distinto di NAT1, o utilizzarlo come anticorpo di cattura; ottimizzare le condizioni di rivestimento e le concentrazioni.
• Includere controlli appropriati: linee cellulari epatiche umane (es. HepG2) come controllo positivo e cellule con knockout di NAT1 o trattate con siRNA come controllo negativo.

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