Anticorpo monoclonale Anti-NBS1/NBN per WB, IP, ELISA - O60934

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NBS1/NBN

• NBS1/NBN è un componente chiave del complesso MRE11-RAD50-NBN (MRN), che svolge un ruolo centrale nella riparazione delle rotture doppi filamento del DNA (DSB), nella ricombinazione omologa (HR), nel mantenimento dell'integrità dei telomeri e nella meiosi. Riferimenti correlati: PMID:10888888, PMID:15616588, PMID:18411307

• All'interno del complesso MRN, NBN funge da adattatore proteico che riconosce e lega specificamente le proteine fosforilate, mediando il reclutamento di fattori di riparazione del DNA e chinasi di segnalazione come MRE11, RAD50, ATM, ATR e DNA-PKcs nei siti delle DSB. Riferimenti correlati: PMID:12419185, PMID:18411307, PMID:18583988, PMID:15064416, PMID:15790808

• Il complesso MRN facilita la resezione delle estremità del DNA tramite le attività endonucleasica ed esonucleasica di MRE11, generando DNA a singolo filamento per la HR; NBN recluta inoltre CtIP (RBBP8) fosforilata per promuovere la resezione e rimuovere gli adduci proteina-DNA. Riferimenti correlati: PMID:19759395, PMID:28867292, PMID:9705271, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182

• NBS1/NBN contribuisce alla regolazione della lunghezza dei telomeri interagendo con TERF2 durante la fase G1 per impedire il reclutamento di DCLRE1B/Apollo, e la fosforilazione di NBN mediata da CDK2 determina la scelta della via di riparazione (NHEJ vs MMEJ) nei telomeri disfunzionali. Riferimenti correlati: PMID:10888888, PMID:28216226

• NBN è espressa ubiquitariamente con livelli elevati nel testicolo e si localizza nel nucleo, sui cromosomi, nei corpi PML e nei telomeri, in coerenza con i suoi ruoli nella riparazione del DNA e nella regolazione del ciclo cellulare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 655-754 di NBN umano (O60934). Questa regione si trova all'interno del dominio C-terminale, che media le interazioni proteiche, e ci si aspetta che rilevi NBN a lunghezza intera. Per applicazioni specifiche per isoforme, si consiglia di utilizzare peptidi mappati su altre regioni.
• Le applicazioni validate includono Western blot (WB), immunoprecipitazione (IP) e ELISA con campioni umani. Per il WB, il peso proteico di NBN è di ~85 kDa. L'espressione endogena varia; il testicolo e le cellule in ciclo attivo sono probabilmente caratterizzati da segnali più intensi.
• Per l'IP, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni del tampone di lisci per preservare l'integrità del complesso MRN, poiché NBN è strettamente associato a MRE11 e RAD50.
• Per l'ELISA, l'immunogeno peptidico sintetico o la proteina NBN ricombinante possono essere utilizzati come antigene di rivestimento. Includere controlli appropriati.

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