Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-NCAPH per WB, IF/ICC, ELISA - Q15003

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NCAPH

• NCAPH codifica per la subunità 2 regolatoria del complesso condensina (nota anche come hCAP-H, CAP-H, BRRN1), essenziale per la condensazione e la segregazione cromosomica mitotica.
• Il complesso condensina, che contiene NCAPH, introduce superavvolgimenti positivi nel DNA e coopera con le topoisomerasi per compattare la cromatina in cromosomi mitotici (PubMed:11136719). Riferimenti correlati: PMID:11136719
• Nelle cellule staminali neurali, NCAPH garantisce un'accurata condensazione cromosomica durante la neurogenesi precoce, e mutazioni loss-of-function portano alla microcefalia primaria di tipo 23 (MCPH23) tramite una ridotta produzione neuronale (PubMed:27737959). Riferimenti correlati: PMID:27737959
• Subcellularmente, NCAPH si localizza nel citoplasma e nel nucleo, e si associa specificamente ai cromosomi durante la mitosi.
• La proteina è soggetta a multiple modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (formazione di legami isopeptidici), che probabilmente ne regolano le funzioni mitotiche.
• NCAPH è ampiamente espresso a bassi livelli in tutti i tessuti, con un'espressione più elevata nelle cellule proliferanti, in linea con il suo ruolo nella divisione cellulare.
• Lo splicing alternativo del gene NCAPH produce varianti trascrizionali multiple, potenzialmente in grado di generare isoforme con differenze funzionali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1‑250 (regione N‑terminale) di NCAPH umano; considerare che l'anticorpo riconosce epitopi all'interno di questo dominio e potrebbe rilevare isoforme contenenti questa sequenza.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 83 kDa nei lisati cellulari umani; convalidare in un sistema di campioni rilevante (es. HeLa, HEK293) e ottimizzare le condizioni di caricamento e trasferimento.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), NCAPH mostra una colorazione nucleare e citoplasmatica; utilizzare protocolli appropriati di fissazione/permeabilizzazione per preservare l'accessibilità dell'epitopo e verificare la co-localizzazione con i cromosomi mitotici.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento; associarlo a un anticorpo di cattura adeguato se si sviluppa un saggio sandwich, e testarlo utilizzando proteina NCAPH ricombinante o lisati cellulari.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza tra lotti e la reattività crociata con subunità della condensina strettamente correlate possono variare; confermare la specificità nella propria applicazione tramite controlli knockdown/knockout o confrontando con pattern di espressione noti.

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