Anticorpo Policlonale Anti-NCF4/p40-phox per WB, ELISA - Q15080

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NCF4/p40-phox

• NCF4 (Fattore citosolico dei neutrofili 4), noto anche come p40-phox, SH3PXD4 o NCF, è una proteina di 39032 Da codificata dal gene NCF4 sul cromosoma 22 umano. È espressa prevalentemente nelle cellule ematopoietiche.
• p40-phox è una subunità regolatoria del complesso NADPH ossidasi dei fagociti, che genera anione superossido (O2(-)) trasferendo elettroni dal NADPH citosolico all'ossigeno molecolare, cruciale per l'uccisione microbica nei fagociti.
• L'attivazione della NADPH ossidasi coinvolge l'assemblaggio delle subunità citosoliche (inclusa p40-phox, p47-phox, p67-phox) con il flavocitocromo b558 legato alla membrana (gp91-phox e p22-phox) in seguito alla stimolazione cellulare.
• p40-phox contiene un dominio PX N-terminale che lega il fosfatidilinositolo 3-fosfato e un dominio SH3 C-terminale, che media le interazioni proteina-lipide e proteina-proteina essenziali per l'attivazione dell'ossidasi e il targeting di membrana.
• A livello subcellulare, p40-phox si trova nel citosol delle cellule a riposo e si trasloca sulle membrane endosomiali e fagosomiali durante l'attivazione, facilitando la produzione localizzata di ROS.
• Lo splicing alternativo produce isoforme e mutazioni in NCF4 sono associate alla malattia granulomatosa cronica autosomica recessiva (CGD), caratterizzata da infezioni ricorrenti.
• La proteina è fosforilata su particolari residui in risposta a stimoli come l'estere forbolico, aumentando la sua affinità di legame per le membrane e contribuendo all'assemblaggio del complesso ossidasico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-190 di NCF4/p40-phox umano (NP_038202.2), comprendente il dominio PX. Convalidare la specificità dell'anticorpo per l'applicazione prevista nel sistema di campioni pertinente.
• Per il Western blot (WB), NCF4/p40-phox ha un peso molecolare previsto di circa 39 kDa. Confermare i pattern di migrazione utilizzando controlli positivi appropriati e considerare le potenziali modificazioni post-traduzionali.
• L'anticorpo è adatto anche per ELISA, riconoscendo probabilmente la proteina nativa. Si raccomandano titolazione e ottimizzazione per ogni setup sperimentale.
• Poiché è riportata reattività incrociata per umano, topo e ratto, considerare questo anticorpo per rilevare p40-phox in queste specie, ma verificare la reattività nei vostri modelli specifici.

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