Anticorpo Monoclonale Anti-NCK1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16333

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NCK1

• NCK1 è una proteina adattatrice SH2/SH3, nota anche come NCK, nck-1 o NCKalpha, codificata dal gene NCK1; lo splicing alternativo produce multiple isoforme.
• Si associa a recettori tirosin-fosforilati dei fattori di crescita (es. KDR, PDGFRB) e ai loro substrati, collegando l'attivazione del recettore a cascate di segnalazione a valle.
• NCK1 mantiene bassi livelli di fosforilazione di EIF2S1 promuovendone la defosforilazione da parte della proteina fosfatasi 1 (PP1), regolando così l'inizio della traduzione.
• Partecipa alla risposta al danno del DNA, facilitando l'attivazione efficiente di effettori a valle come CHEK2, a valle dei sensori di danno ATM/ATR.
• La proteina modula l'attivazione di EIF2AK2/PKR da parte dell'RNA a doppia elica, influenzando la risposta allo stress integrata.
• NCK1 interagisce con i recettori efrina, contribuendo potenzialmente ai processi di adesione e migrazione cellulare.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il reticolo endoplasmatico e il nucleo, coerente con i suoi ruoli nella trasduzione del segnale e nell'espressione genica.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono modulare le sue interazioni e funzioni; la proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 43kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dagli aminoacidi 200-300 di NCK1 umano; considerare l'uso di un controllo positivo che esprima la proteina NCK1 a lunghezza intera per la validazione.
• Per il Western blot, rilevare una banda a circa 43kDa in lisati da linee cellulari umane, murine o di ratto; validare la specificità con blocco peptidico o controlli di knockdown/knockout.
• Nell'immunoistochimica (sezioni in paraffina), potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene; ottimizzare le condizioni di colorazione per ogni tipo di tessuto.
• Per immunofluorescenza/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per preservare l'accessibilità dell'epitopo e l'architettura cellulare.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'abbinamento con un anticorpo di rilevamento adatto; considerare titrazioni a scacchiera per un rapporto segnale/rumore ottimale.

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