Anticorpo policlonale di coniglio anti-NCOA3 per WB, IP, ELISA - Q9Y6Q9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NCOA3

• NCOA3 (coattivatore 3 dei recettori nucleari), noto anche come SRC-3, ACTR, AIB1, RAC3, pCIP, TRAM-1 e bHLHe42, è un coattivatore trascrizionale chiave che si lega direttamente ai recettori nucleari e stimola l'espressione genica ormono-dipendente.
• Funziona come piattaforma centrale per complessi coattivatori multisubunità, facilitando il rimodellamento della cromatina per consentire l'attivazione trascrizionale.
• NCOA3 coattiva un'ampia gamma di recettori nucleari, inclusi i recettori steroidei (recettori dei glucocorticoidi e degli estrogeni), i recettori dei retinoidi (RAR e RXR), i recettori degli ormoni tiroidei, il recettore della vitamina D3 e i recettori dei prostanoidi (PPAR).
• La proteina possiede un'attività intrinseca di acetiltransferasi degli istoni (HAT), contribuendo alla modificazione della cromatina e alla regolazione epigenetica della trascrizione.
• Oltre ai recettori nucleari, NCOA3 partecipa anche alla coattivazione della via NF-kappa-B attraverso l'interazione con la subunità NFKB1.
• La localizzazione subcellulare è sia citoplasmatica sia nucleare, in linea con il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale e nella regolazione trascrizionale.
• L'espressione tissutale è diffusa, con i livelli più elevati nel cuore, nel muscolo scheletrico, nel pancreas e nella placenta; l'espressione è inferiore nel cervello, nei polmoni, nel fegato e nei reni.
• Modificazioni post-traduzionali quali acetilazione, metilazione e fosforilazione regolano la stabilità, l'attività e le interazioni di NCOA3.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, considerare che NCOA3 ha un peso molecolare previsto di circa 155 kDa; utilizzare una percentuale di gel e condizioni di trasferimento adeguate per proteine ad alto peso molecolare.
• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione N-terminale (aa 1-100) di NCOA3 umano; verificare l'accessibilità dell'epitopo nel proprio sistema campione, soprattutto se i partner di interazione endogeni possono mascherarlo.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale di coniglio, può riconoscere più isoforme di NCOA3; considerare l'utilizzo di controlli specifici per isoforma se è necessaria un'identificazione precisa.
• Per l'immunoprecipitazione, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione in base al tipo di lisato; la reattività crociata è confermata per l'uomo.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere una coppia di anticorpi abbinati o una marcatura diretta; validare la linearità del segnale con quantità note di proteina ricombinante o di standard peptidico.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, cellule che sovraesprimono NCOA3 e lisati knockout) per confermare la specificità.

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