Anticorpo policlonale coniglio Anti-NDST1 per WB, ELISA - P52848

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NDST1

• NDST1 è l'enzima bifunzionale essenziale che avvia la modifica dell'eparan solfato catalizzando sequenzialmente la N-deacetilazione e la N-solfatazione dei residui di glucosamina, producendo l'eparosan N-solfato richiesto per la biosintesi successiva di eparina ed epiran solfato. Riferimenti correlati: PMID:35137078, PMID:9230113, PMID:9744796
• Questo passaggio enzimatico è limitante per la velocità e determina il pattern finale di solfatazione dell'eparan solfato, che a sua volta definisce la sua capacità di interagire con proteine come la L-selectina, partecipando quindi all'adesione e al traffico delle cellule infiammatorie.
• L'attività di NDST1 è necessaria per la secrezione esosomiale di sindecan, SDCBP (sintenina) e CD63, evidenziando una funzione non canonica nella biogenesi o nel rilascio delle vescicole extracellulari. Riferimenti correlati: PMID:22660413
• Una isoforma splice alternativa (isoforma 2) non possiede entrambe le attività catalitiche e funziona come regolatore dominante negativo, potenzialmente alterando la stechiometria dei complessi enzimatici della biosintesi.
• Subcellularmente, NDST1 è una proteina integrale di membrana dell'apparato di Golgi, con una doppia localizzazione nelle membrane del cis-Golgi e della rete trans-Golgiana.
• La proteina è ampiamente espressa in tutti i tessuti, ma è particolarmente abbondante nel cuore, nel fegato e nel pancreas, coerentemente con i sistemi organici che richiedono una biosintesi estesa di epiran solfato.
• NDST1 è soggetto a glicosilazione e formazione di ponti disolfuro; le mutazioni nel gene NDST1 sono associate a disabilità intellettiva, a conferma del suo ruolo critico nello sviluppo.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 40–170) comprende la regione N-terminale condivisa sia dall'isoforma 1 che dall'isoforma 2 dominante negativa; pertanto, l'anticorpo può riconoscere entrambe le varianti di splicing e deve essere validato nel sistema di campione pertinente.
• Nel Western blotting, la proteina NDST1 matura migra con un peso molecolare apparente di ~101 kDa; spostamenti della banda o bande multiple possono derivare da glicosilazione o complessi legati da ponti disolfuro, quindi è consigliabile utilizzare condizioni riducenti e controlli positivi appropriati.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; gli utenti finali devono eseguire titolazioni a scacchiera con il loro antigene bersaglio specifico (proteina ricombinante o lisato cellulare) per ottimizzare le prestazioni.
• Poiché è riportata una reattività crociata con NDST1 di topo, l'anticorpo è adatto per studi su modello murino; ciononostante, è necessario confermare la conservazione dell'epitopo tramite allineamento di sequenza e esperimenti pilota su campioni derivati da topo.

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