Anticorpo policlonale anti-NDUFS3 per WB e ELISA - O75489

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NDUFS3

• NDUFS3 è una proteina ferro-zolfo da 30 kDa che funge da subunità fondamentale del Complesso I mitocondriale (NADH:ubichinone ossidoreduttasi).
• È essenziale per l'attività catalitica del Complesso I, facilitando il trasferimento di elettroni dal NADH all'ubichinone e contribuendo al traslocazione di protoni attraverso la membrana interna. Riferimenti correlati: PMID:14729820, PMID:30140060
• NDUFS3 svolge un ruolo cruciale nell'assemblaggio e nella stabilizzazione dell'oloenzima del Complesso I; le mutazioni in questo gene causano la deficienza del complesso I mitocondriale (MC1DN8). Riferimenti correlati: PMID:24028823
• La proteina viene sintetizzata come precursore con una sequenza di targeting mitocondriale N-terminale, che viene rimossa dopo l'importazione nel mitocondrio.
• Si localizza alla membrana interna mitocondriale, dove si integra nel braccio di membrana del Complesso I.
• Lo splicing alternativo del gene NDUFS3 produce multiple varianti di trascritto, potenzialmente regolando l'espressione o la funzione proteica.
• Come parte della catena respiratoria, NDUFS3 è espresso ubiquitariamente ma è particolarmente abbondante nei tessuti ad alto fabbisogno energetico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione comune a NDUFS3 umano (aa 37-264), che è altamente conservata nel topo, supportando le affermazioni di reattività crociata nella scheda tecnica. I ricercatori dovrebbero validare la reattività specifica per la specie nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blotting, utilizzare lisati arricchiti di mitocondri o lisati cellulari totali da tessuti con alto contenuto mitocondriale (es. cuore, fegato) per migliorare il rilevamento della banda di ~30 kDa.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo dello stesso frammento proteico ricombinante come antigene di rivestimento per il rilevamento quantitativo di anticorpi specifici per NDUFS3.
• Includere controlli appropriati: un controllo positivo come un lisato tissutale umano o di topo noto per esprimere NDUFS3, e un controllo negativo (es. campione NDUFS3 knockout o depleto) per confermare la specificità.
• Ottimizzare empiricamente la diluzione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione per ogni applicazione, poiché gli anticorpi policlonali possono presentare variabilità da lotto a lotto.

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