Anticorpo policlonale anti-NDUFV1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49821

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NDUFV1

• NDUFV1 codifica per la NADH deidrogenasi [ubichinone] flavoproteina 1, nota anche come Complesso I-51kD (CI-51kD), una subunità fondamentale del Complesso I della catena respiratoria mitocondriale.
• Come parte del braccio periferico del Complesso I, NDUFV1 contiene flavina mononucleotide (FMN) che funge da accettore iniziale di elettroni dal NADH e un cluster ferro-zolfo (4Fe-4S) che facilita il trasferimento degli elettroni all'ubichinone tramite una catena di cluster ferro-zolfo (PMID:28844695). Riferimenti correlati: PMID:28844695
• NDUFV1 è localizzata nella membrana interna mitocondriale, dove partecipa al trasporto degli elettroni e al traslocazione dei protoni, accoppiandosi alla sintesi di ATP.
• La proteina appartiene alla famiglia delle flavoproteine NADH-ubichinone ossidoreduttasi ed è altamente conservata tra le specie, con ortologhi nel topo e nel ratto.
• Lo splicing alternativo del gene NDUFV1 produce multiple varianti di trascritto, potenzialmente dando luogo a isoforme con sequenze N-terminali distinte; l'immunogeno corrisponde ai primi 250 aminoacidi dell'isoforma canonica.
• NDUFV1 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e metilazione, e contiene un peptide di transito per l'importo mitocondriale.
• Le mutazioni in NDUFV1 sono associate alla sindrome di Leigh, una grave malattia mitocondriale caratterizzata da una degenerazione neurologica progressiva.
• Le parole chiave per NDUFV1 includono: Flavoproteina, FMN, 4Fe-4S, Ferro, Legante metallico, NAD, Ossidoreduttasi, Catena respiratoria, Ubichinone, Membrana interna del mitocondrio e Malattia mitocondriale primaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli aminoacidi 1-250 di NDUFV1 umano; questa regione N-terminale può rilevare la proteina a lunghezza intera e potenzialmente alcune varianti di splicing.
• Per il western blot (WB), il peso molecolare previsto è di ~51 kDa; si consiglia di utilizzare tessuti o lisati cellulari ricchi di mitocondri (es. cuore, muscolo o cellule coltivate) per garantire un'abbondanza sufficiente dell'antigene.
• In IHC-paraffina (IHC-P) e immunofluorescenza/ICC (IF/ICC), pre-validare la diluzione dell'anticorpo e la specificità del segnale con appropriati tessuti/cellule di controllo positivi e negativi, data la localizzazione mitocondriale.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con NDUFV1 di topo e ratto, indicando il riconoscimento di un epitopo conservato; questo può essere vantaggioso per studi su modelli roditori.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento adatto può permettere la misurazione dei livelli di NDUFV1 in estratti mitocondriali o nel Complesso I purificato.
• Come per tutti gli anticorpi policlonali, può verificarsi variabilità tra lotti; si consiglia di convalidare nel proprio sistema di saggio specifico.

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