Anticorpo Monoclonale Anti-NEDD4 per WB, ELISA - P46934

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NEDD4

• NEDD4 (Proteina 4 espressa dalle cellule precursori neurali e regolata in negativa durante lo sviluppo) è una ligasi E3 ubiquitina-proteina di tipo HECT che trasferisce l'ubiquitina alle proteine bersaglio, catalizzando principalmente la poliubiquitinazione legata a Lys-63. Riferimenti correlati: PMID:19920177 PMID:21399620 PMID:23644597
• Regola i recettori tirosin chinasici mono-ubiquitinando IGF1R e FGFR1, portando alla loro internalizzazione e degradazione lisosomiale. Riferimenti correlati: PMID:21765395
• NEDD4 ubiquitina molecole di segnalazione chiave tra cui VEGFR-2/KDFR, RAPGEF2, dominio intracellulare di ERBB4, TNK2 e POLR2A, influenzando processi come lo sviluppo delle dendriti neuronali, la segnalazione EGFR e la regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:11598133 PMID:20086093 PMID:19920177
• Forma un complesso di deubiquitinazione con USP13 per scindere le catene di ubiquitina legate a Lys-48 da VPS34, stabilizzando VPS34 e promuovendo la formazione dell'autofagosoma. Riferimenti correlati: PMID:32101753
• A livello subcellulare, NEDD4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare, in linea con i suoi ruoli nell'endocitosi, nella segnalazione nucleare e nel turnover delle proteine associate alla membrana.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme e le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività e le sue interazioni.
• Durante l'infezione virale, NEDD4 ubiquitina la proteina VP40 del virus Ebola, facilitando il rilascio virale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1200–1300 all'interno della regione C-terminale di NEDD4 umano. Confermare la reattività dell'anticorpo con isoforme specifiche se sono presenti varianti multiple nel campione bersaglio.
• Per il Western blotting, NEDD4 ha un peso molecolare previsto di ~149 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 6–8% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un blotting efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Validare l'anticorpo nel proprio sistema di campione utilizzando controlli positivi (es. lisati di HEK293 o HeLa) per garantire specificità e sensibilità per l'applicazione prevista.
• Per l'ELISA, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e di rilevamento per ottenere il massimo rapporto segnale/rumore.

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