Anticorpo policlonale anti-NEDD4 per WB, IHC-P, ELISA - P46934

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NEDD4

• NEDD4 (proteina 4 espressa nelle cellule precursori neurali e down-regolata durante lo sviluppo) è nota anche come RPF1, NEDD4-1 e proteina 53 inducente la proliferazione cellulare. È una ligasi E3 dell'ubiquitina di tipo HECT che svolge ruoli fondamentali nella degradazione proteica, nella segnalazione dei recettori e nell'autofagia.
• In qualità di ligasi E3 dell'ubiquitina, NEDD4 accetta l'ubiquitina dagli enzimi E2 e trasferisce specificamente l'ubiquitina alla lisina-63 dei substrati bersaglio, formando catene di poliubiquitina. Riferimenti correlati: PMID:19920177, PMID:21399620, PMID:23644597
• NEDD4 ubiquitina un'ampia gamma di substrati, inclusi i recettori dei fattori di crescita (IGF1R, FGFR1, EGFR), le proteine di segnalazione (RAPGEF2, TNK2, BRAT1, DAZAP2) e il macchinario trascrizionale (POLR2A), indirizzandone molti verso l'internalizzazione e la degradazione lisosomiale o proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:21765395, PMID:11598133, PMID:20086093, PMID:25631046, PMID:11342538, PMID:19920177
• Il ruolo di NEDD4 nella regolazione della stabilità di PTEN attraverso la poliubiquitinazione è stato oggetto di dibattito; alcuni studi suggeriscono un legame diretto, mentre altri lo mettono in discussione. Riferimenti correlati: PMID:18562292, PMID:17218260
• NEDD4 funge da piattaforma per il reclutamento di USP13, formando un complesso di deubiquitinazione che scinde le catene di ubiquitina legate tramite Lys-48 da VPS34, stabilizzando VPS34 e promuovendo la formazione degli autofagosomi. Riferimenti correlati: PMID:32101753
• Durante l'infezione virale, NEDD4 ubiquitina VP40 del virus Ebola, contribuendo al gemmazione virale.
• NEDD4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare e subisce modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 160-460, una regione centrale di NEDD4 umano, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere più isoforme o domini funzionali; si raccomanda la validazione nel sistema campione previsto.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 149 kDa; si consiglia di utilizzare un gel a percentuale inferiore (ad es. 6-8%) e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente delle proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (tessuti inclusi in paraffina), potrebbe essere necessario ottimizzare le condizioni di recupero antigenico; includere controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può garantire un'elevata avidità; valutare le prestazioni sia come anticorpo di cattura sia come anticorpo di rilevazione e validare rispetto a standard ricombinanti pertinenti.

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