Anticorpo monoclonale di coniglio anti-NEDD4L per WB, ELISA - Q96PU5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NEDD4L

• NEDD4L è una ligasi E3 dell'ubiquitina-proteina di tipo HECT che media la poliubiquitinazione delle proteine bersaglio, regolando processi quali autofagia, immunità innata e riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:20064473 PMID:31959741 PMID:33608556
• Inibisce la segnalazione del TGF-beta inducendo l'ubiquitinazione e la degradazione di SMAD2 e TGFBR1 dipendente dal proteasoma. Riferimenti correlati: PMID:15496141
• NEDD4L promuove l'ubiquitinazione e l'internalizzazione di vari canali della membrana plasmatica, tra cui ENaC, i canali del sodio voltaggio-dipendenti (SCN2A, SCN3A, SCN5A, SCN9A, SCN10A), i canali del potassio (KCNA3, KCNH2, KCNQ2, KCNQ3), il trasportatore del glutammato EAAT1 e il canale del cloro CLC5. Riferimenti correlati: PMID:26363003 PMID:27445338
• Ubiquitina e degrada SGK1, TNK2, ULK1 e ASCT2, influenzando la crescita cellulare, l'autofagia e la segnalazione di TOR. Riferimenti correlati: PMID:25631046 PMID:28820317 PMID:27694961
• Nell'immunità innata antivirale, NEDD4L catalizza l'ubiquitinazione della cisteina di TRAF3 legata tramite Lys-29, potenziando l'ubiquitinazione di TRAF3 legata tramite 'Lys-48' e 'Lys-63'. Riferimenti correlati: PMID:33608556
• La proteina NEDD4L appartiene alla famiglia NEDD4 delle ligasi E3 dell'ubiquitina di tipo HECT e subisce uno splicing alternativo, producendo molteplici isoforme.
• NEDD4L è localizzata nel citoplasma, nell'apparato del Golgi e nei compartimenti degli endosomi/corpi multivescicolari.
• È espressa ubiquitariamente, con i livelli più elevati nella prostata, nel pancreas e nei reni, ed è presente anche nei melanociti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato a partire da un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 876-975 di NEDD4L umano; questa regione può essere conservata tra le isoforme, ma è necessario confermarne la specificità nel sistema sperimentale pertinente.
• Nel Western blot, NEDD4L migra a circa 112 kDa; assicurarsi di utilizzare condizioni di trasferimento adeguate (ad esempio, un tempo di trasferimento prolungato o una tensione più elevata) per rilevare questa proteina ad alto peso molecolare.
• Validare l'espressione di NEDD4L in linee cellulari o tessuti umani con espressione notoriamente elevata, come rene, prostata o pancreas, per confermare la reattività dell'anticorpo.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, includere controlli positivi e negativi appropriati per garantire la specificità; considerare l'analisi di una serie di diluizioni per ottimizzare la concentrazione di lavoro.

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