Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-NEK7 per WB, ELISA - Q8TDX7

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NEK7

• NEK7 (NIMA-related kinase 7) è una serina/treonina chinasi che svolge un ruolo essenziale nella progressione del ciclo cellulare mitotico, inclusa la nucleazione dei microtubuli del centrosoma, la formazione del fuso mitotico e la citocinesi.

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• Fosforila bersagli a valle come EML4 in Ser-146, promuovendo il suo distacco dai microtubuli per un efficiente congressione cromosomica, e RPS6KB1.

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• Oltre alla mitosi, NEK7 funge da attivatore critico dell'infammasoma NLRP3, sbloccando NLRP3 al centro di organizzazione dei microtubuli (MTOC) e consentendo l'attivazione di CASP1 indipendentemente dalla sua attività chinasica.

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>L'interazione di NEK7 con NEK9 impone la mutua esclusività tra l'attivazione dell'infammasoma e la divisione cellulare, agendo come un interruttore cellulare.

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• A livello subcellulare, NEK7 si localizza nel nucleo, citoplasma, poli del fuso, centrosomi e MTOC.

• È altamente espresso nel polmone, muscolo, testicolo, cervello, cuore, fegato, leucociti e milza, con espressione inferiore nell'ovaio, prostata e rene; assente nell'intestino tenue.

• Le caratteristiche strutturali e regolatorie chiave includono un dominio chinasi di legame dell'ATP, siti di legame dei metalli e modificazioni post-traduzionali come acetilazione e fosforilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre una regione conservata (aa 203-302) di NEK7 umano; prevista la rilevazione della proteina endogena di ~35 kDa in WB con campioni umani, di topo e di ratto a causa dell'alta omologia di sequenza.
• Per la WB, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari comunemente disponibili (es. HeLa, HEK293T, Jurkat) come controlli positivi e validare con campioni di knockdown o knockout specifici per confermare l'identità della banda.
• Per l'ELISA, la proteina ricombinante NEK7 o il peptide possono essere utilizzati come antigene di rivestimento; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale nel sistema di saggio.
• Quando si studiano le vie correlate all'infammasoma, includere trattamenti di attivazione appropriati (es. priming con LPS + nigericina) per valutare il ruolo di NEK7; notare che la sua funzione nell'attivazione di NLRP3 è indipendente dalla chinasi.
• Dato la sua localizzazione nucleare e citoplasmatica, la frazionamento subcellulare può essere impiegato per arricchire compartimenti specifici prima del rilevamento.

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