Anticorpo policlonale Anti-NELFE per WB, IHC-P, ELISA - P18615

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NELFE

• NELFE (Negative Elongation Factor E), noto anche come RD, RDBP o RDP, è una proteina legante l'RNA di 43 kDa che è una subunità essenziale del complesso umano Negative Elongation Factor (NELF).
• Come parte del complesso NELF, NELFE coopera con il DRB Sensitivity-Inducing Factor (DSIF) per indurre la pausa trascrizionale della RNA Polimerasi II, un passaggio chiave nella regolazione dell'allungamento precoce. Il complesso chinasi P-TEFb fosforila successivamente il complesso per rilasciare la pausa. Riferimenti correlati: PMID:10199401 PMID:27256882 PMID:11940650 PMID:12612062
• NELFE fornisce la più forte attività di legame all'RNA del complesso NELF, probabilmente mediando il reclutamento iniziale ai trascritti di RNA nascenti. Riferimenti correlati: PMID:18303858 PMID:27256882 PMID:27282391
• La proteina è localizzata nel nucleo ed è associata ai cromosomi.
• NELFE è ampiamente espresso nei tessuti umani, inclusi cuore, cervello, polmone, placenta, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas.
• Oltre al suo ruolo canonico nella regolazione della trascrizione, il complesso NELF è stato implicato nel mantenimento della latenza dell'HIV-1.
• Il record UniProt annota multiple modificazioni post-traduzionali su NELFE, come ADP-ribosilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, insieme a caratteristiche strutturali tra cui domini a cappio e elementi di sequenza ripetitivi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato generato contro la regione N-terminale (aa 1–280). Considerare l'accessibilità dell'epitopo nelle conformazioni native della proteina per gli esperimenti IHC-P.
• I protocolli standard di blocco e diluizione degli anticorpi per anticorpi policlonali devono essere ottimizzati empiricamente per ogni applicazione (WB, IHC-P, ELISA) e tipo di campione.
• Per il western blotting, è prevista una banda intorno a 43 kDa; validare la specificità utilizzando appropriati controlli positivi e negativi (es. linee cellulari knockout se disponibili).
• Nell'immunoistochimica, potrebbero essere richiesti metodi di recupero dell'antigene; testare sia il recupero indotto dal calore che quello enzimatico per determinare le condizioni di colorazione ottimali.

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