Anticorpo monoclonale coniglio anti-Nephrina per WB, IHC-P, ELISA - O60500

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Nephrina

• La Nephrina è un recettore di adesione cellulare specifico del glomerulo renale codificato dal gene NPHS1, noto anche come NPHN o CNF. Si tratta di una proteina transmembrana con domini immunoglobulinici, legami disolfuro e siti di glicosilazione (UniProt O60500).
• Svolge un ruolo fondamentale nello sviluppo e nella funzionalità della barriera di filtrazione glomerulare renale, regolando la permeabilità vascolare e ancorando il diaframma a fessura dei podociti al citoscheletro di actina.
• La Nephrina è espressa specificamente nei podociti dei glomeruli renali, in linea con il suo ruolo nel mantenimento dell'integrità del diaframma a fessura.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare e va incontro a splicing alternativo, che produce isoforme con potenziale diversità funzionale.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e glicosilazione, che possono regolarne l'attività e le interazioni.
• Per similarità, la Nephrina è stata coinvolta nella formazione del muscolo scheletrico attraverso la regolazione della fusione dei mioblasti, suggerendo ruoli che vanno oltre il rene.
• Le varianti di NPHS1 associate a patologie sono collegate alla sindrome nefrosica congenita, evidenziandone l'importanza clinica.
• Parole chiave associate alla Nephrina: adesione cellulare, proteina dello sviluppo, variante patologica, glicoproteina, membrana, fosfoproteina e miogenesi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 1019-1241) della Nephrina umana, che è intracellulare e può essere meno glicosilata; questo design contribuisce probabilmente alla reattività crociata con topo e ratto.
• Per Western blot, il peso molecolare atteso è di circa 135 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni riducenti per risolvere la forma glicosilata matura.
• In IHC-P, è attesa una colorazione specifica nei podociti glomerulari; ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene e di rilevazione per sezioni renali fissate in formalina e incluse in paraffina.
• Per ELISA, si consiglia l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione che bersaglia un epitopo diverso; questo anticorpo monoclonale può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevazione.
• Validare la reattività crociata in campioni di rene di topo e ratto, poiché l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno può influenzare la reattività.

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