Anticorpo Monoclonale Anti-Nesprin 1 per WB, IF/ICC ed ELISA - Q8NF91

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Nesprin 1

• Nesprin-1 (noto anche come SYNE1, Enaptin, MYNE1, KASH1) è una proteina modulare multi-isomorfica che forma una rete di collegamento tra organelli e il citoscheletro di actina per mantenere l'organizzazione spaziale subcellulare.
• Come componente principale del complesso LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton), connette la lamina nucleare al citoscheletro, mediando la trasmissione della forza meccanica attraverso l'involucro nucleare e regolando il movimento e il posizionamento del nucleo.
• Insieme a SUN1/2 e ai complessi motori dineina-dinactina citoplasmatica, Nesprin-1 può partecipare all'attacco nucleo-centrosoma e alla migrazione nucleare nei progenitori neurali, con SYNE1 e SYNE2 che agiscono in modo ridondante.
• È richiesto per la migrazione del centrosoma alla superficie apicale della cellula durante la ciliogenesi precoce e può contribuire al rimodellamento nucleare durante la formazione della testa dello spermatozoo tramite un probabile complesso LINC SUN3:SYNE1/KASH1.
• La localizzazione subcellulare include la membrana nucleare esterna, l'involucro nucleare, il citoplasma, il citoscheletro, il sarcomero del miofibrilla e l'apparato di Golgi.
• Ampiamente espresso con alti livelli nei muscoli scheletrici e lisci, cuore, milza, leucociti del sangue periferico, pancreas, cervelletto, stomaco, rene e placenta; l'isoforma GSRP-56 è prevalentemente espressa nel cuore e nel muscolo scheletrico.
• Le principali modifiche post-traduzionali e le caratteristiche strutturali includono lo splicing alternativo, la fosforilazione, la formazione di legami disolfuro e la presenza di ripetizioni spetrine e un'elica transmembrana, come indicato dalle parole chiave UniProt.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il western blotting, Nesprin-1 esiste come multiple isoforme; l'isoforma principale migra a circa 1011 kDa, mentre un'isoforma più piccola può apparire intorno a 112 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 4-6% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento estesi per garantire che le proteine ad alto peso molecolare siano trasferite in modo efficiente.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, prevedere una colorazione all'involucro nucleare, nel citoplasma e possibilmente nelle strutture del citoscheletro. Validare con marker subcellulari noti.
• Per l'ELISA, assicurarsi che il rivestimento dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo siano ottimizzati utilizzando l'immunogeno ricombinante come standard di riferimento.

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