Anticorpo policlonale anti-Nesprin 1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8NF91

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Nesprin 1

• La Nesprin-1 (proteina 1 dell'involucro nucleare contenente ripetizioni di spettrina), codificata dal gene SYNE1, è una proteina modulare multi-isoforma con un peso molecolare a lunghezza intera di circa 1011 kDa. Diverse varianti di splicing generano isoforme tessuto-specifiche, tra cui una forma più piccola di circa 112 kDa.
• In quanto componente centrale del complesso LINC (Linker of Nucleoskeleton and Cytoskeleton, collegamento tra nucleoscheletro e citoscheletro), la Nesprin-1 connette la lamina nucleare al citoscheletro di actina, facilitando la trasmissione delle forze meccaniche attraverso l'involucro nucleare e regolando il posizionamento e il movimento del nucleo.
• SYNE1 agisce in modo ridondante con il suo paralogo SYNE2 in processi quali l'ancoraggio nucleo-centrosoma e la migrazione nucleare nei progenitori neurali, spesso in associazione con le proteine contenenti il dominio SUN e con i complessi motori citoplasmatici dineina-dinactina.
• A livello subcellulare, la Nesprin-1 si localizza prevalentemente sulla membrana nucleare esterna, ma è presente anche nell'involucro nucleare, nel citoscheletro, nei sarcomeri e nell'apparato di Golgi, riflettendo i suoi diversi ruoli nell'architettura intracellulare.
• La proteina contiene ripetizioni di spettrina e un dominio KASH C-terminale, che la ancora all'involucro nucleare. È soggetta a fosforilazione e potenzialmente ad altre modificazioni post-traduzionali, come indicato dai dati di proteomica.
• La Nesprin-1 è ampiamente espressa, con livelli più elevati nei muscoli scheletrici e lisci, nel cuore, nella milza e in diversi altri tessuti. Un'isoforma corta (GSRP-56) è espressa prevalentemente nel cuore e nei muscoli scheletrici.
• Le mutazioni di SYNE1 sono associate alla distrofia muscolare di Emery-Dreifuss e ad altre patologie, sottolineando il ruolo fondamentale della proteina nella funzione muscolare e nella meccanica nucleare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 8220–8410 all'interno della regione delle ripetizioni di spettrina dell'isoforma 2 della Nesprin-1 umana. Questa sequenza è conservata negli ortologhi di topo e ratto, supportando la reattività crociata.
• Per la rilevazione mediante Western blot, si noti che la Nesprin-1 a lunghezza intera (~1011 kDa) richiede protocolli specializzati di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare. Una banda più facilmente rilevabile intorno a 112 kDa può rappresentare isoforme più piccole o prodotti di clivaggio.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza, la Nesprin-1 mostra tipicamente un pattern di colorazione a margine nucleare e filamentoso citoplasmatico; si raccomandano una fissazione appropriata (ad esempio, PFA al 4%) e la permeabilizzazione.
• Quando viene utilizzato nell'immunoistochimica su sezioni in paraffina, può essere necessario il recupero antigenico; validare la specificità della colorazione mediante controlli positivi e negativi appropriati.

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