Anticorpo monoclonale Anti-Nesprin3 (KASH3) per WB, ELISA - Q6ZMZ3

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Nesprin-3

• La Nesprin-3, anche nota come proteina 3 contenente il dominio KASH (KASH3) o proteina 3 con ripetizioni di spectrina dell'involucro nucleare, è codificata dal gene SYNE3 (C14orf139, C14orf49, LINC00341) ed è un componente del complesso LINC (Collegamento tra Nucleoscheletro e Citoscheletro).
• Funziona come proteina di ancoraggio che lega il nucleo al citoscheletro legandosi alla plectina (PLEC), la quale interagisce con il sistema dei filamenti intermedi, mediando così la connessione tra la lamina nucleare e il citoscheletro.
• Il complesso LINC è essenziale per trasmettere forze meccaniche attraverso l'involucro nucleare, e la Nesprin-3 svolge un ruolo nel movimento e nel posizionamento del nucleo.
• Nelle cellule endoteliali aortiche, la Nesprin-3 è necessaria per la polarizzazione indotta dal flusso del centrosoma e per la migrazione direzionale, e contribuisce alla regolazione della morfologia cellulare.
• La Nesprin-3 si localizza sulla membrana nucleare esterna, sull'involucro nucleare e sul reticolo endoplasmatico rugoso.
• È espressa a livello proteico nelle cellule endoteliali aortiche.
• La proteina ha un peso molecolare approssimativo di 112 kDa, in linea con l'annotazione UniProt, e presenta ripetizioni di spectrina, un dominio a spirale avvolta (coiled coil) e un'elica transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato utilizzando una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 750–935 della Nesprin-3 umana, una regione all'interno del dominio delle ripetizioni di spectrina. Questo design può consentire il riconoscimento della Nesprin-3 a lunghezza intera e di potenziali isoforme generate da splicing alternativo.
• Per il Western blot (WB), lisati di cellule endoteliali aortiche umane o altre linee cellulari che esprimono Nesprin-3 sono controlli positivi adatti. La dimensione attesa della banda è ~112 kDa. Considerare l'uso di appropriati controlli di caricamento e validare la reattività in campioni di topo se necessario.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Ottimizzare le condizioni di coating e rilevamento utilizzando proteina ricombinante purificata di Nesprin-3 o estratti cellulari. La reattività crociata con altre proteine del dominio KASH dovrebbe essere valutata nel contesto sperimentale.
• Poiché la spedizione avviene in sacchetti di ghiaccio, assicurarsi una corretta conservazione all'arrivo (ad esempio, aliquote e conservazione a -20°C o -80°C come raccomandato) per mantenere la stabilità dell'anticorpo.

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