Anticorpo policlonale coniglio anti-NET1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z628

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NET1

• NET1 (Neuroepithelial cell-transforming gene 1) è un proto-oncogene noto anche come ARHGEF8 e p65 Net1. Funziona come fattore di scambio di nucleotidi guaninici (GEF) attivando specificamente la GTPasi RhoA.
• La proteina è coinvolta nella riorganizzazione del citoscheletro e nelle vie di trasduzione del segnale, inclusa la potenziale attivazione della via SAPK/JNK.
• NET1 stimula le attività di RHOB indotte da stress genotossico nelle cellule del cancro al seno, contribuendo alla morte cellulare.
• Si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, suggerendo ruoli di shuttling.
• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali come acetilazione e fosforilazione, come indicato dall'identificazione proteomica.
• Ampiamente espressa nei tessuti umani, con lo splicing alternativo che genera multiple varianti di trascritto.
• Sono stati riportati studi strutturali (struttura 3D), fornendo approfondimenti sull'organizzazione dei domini e sulla regolazione.
• Come proto-oncogene, NET1 è di notevole interesse nella ricerca sul cancro, in particolare nelle vie che governano la proliferazione cellulare e la sopravvivenza.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-300 di NET1 umano (NP_001040625.1), comprendendo la regione N-terminale. Considerare la verifica del legame al NET1 endogeno al peso molecolare atteso (~68 kDa) nel proprio sistema di campionamento.
• Per il western blotting, eseguire una titolazione dell'anticorpo primario e includere appropriati controlli positivi (es. lisati da linee cellulari con espressione nota di NET1) e controlli negativi.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, valutare i segnali di localizzazione subcellulare; è possibile osservare sia colorazione citoplasmica che nucleare.
• Per l'ELISA, validare sensibilità e specificità utilizzando la proteina NET1 ricombinante o saggi di competizione basati su peptidi.
• Dato che l'anticorpo cross-reattiva con NET1 umano e murino, può essere utilizzato attraverso queste specie; tuttavia, confermare la reattività nel sistema modello previsto prima di studi su larga scala.

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