Anticorpo Monoclonale Anti-Neurofilamento H per WB, IP, ELISA - P12036

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Neurofilamento H (NFH)

• Il Neurofilamento H (NFH), noto anche come proteina neurofilamentosa da 200 kDa o proteina tripla neurofilamentosa H, è un componente polipeptidico pesante dei filamenti intermedi neuronali.
• NFH è essenziale per il mantenimento del calibro neuronale e ha un ruolo critico negli assoni maturi che non è compensato dalle proteine neurofilamentose più piccole NEFL e NEFM.
• Può cooperare con altre proteine dei filamenti intermedi neuronali come la periferina (PRPH) e l'internexina (INA) per formare reti filamentose nei neuroni (Per similarità).
• La proteina si localizza nel citoplasma, in particolare all'interno del citoscheletro degli assoni, dove contribuisce all'integrità strutturale e al trasporto assonale.
• NFH subisce un'ampia fosforilazione post-traduzionale, che si pensa regoli l'assemblaggio dei filamenti e le interazioni con altri elementi del citoscheletro.
• Lo splicing alternativo del gene NEFH produce multiple isoforme, potenzialmente modulandone la funzione.
• Le varianti genetiche in NEFH sono associate a malattie neurodegenerative, tra cui la sclerosi laterale amiotrofica (SLA) e la malattia di Charcot-Marie-Tooth tipo 2CC (CMT2CC), sottolineandone la rilevanza clinica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 550–650 del Neurofilamento H umano, una regione che può essere conservata tra le specie (sulla base dei dati di reattività crociata), suggerendo un epitopo antigenico robusto.
• Per il Western Blot (WB), attendersi una banda di circa 112 kDa; si raccomanda l'ottimizzazione della preparazione del campione e delle condizioni di rilevamento utilizzando lisati appropriati di cellule o tessuti neuronali.
• Nelle applicazioni di immunoprecipitazione (IP), la pre-pulizia e la titolazione dell'anticorpo possono migliorare la specificità; una successiva rilevazione WB può confermare il bersaglio.
• L'ELISA può essere impiegato per il rilevamento quantitativo; utilizzare proteina o peptide purificato come controllo e validare nella matrice biologica rilevante.
• A causa del potenziale per modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione), considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare lo stato endogeno.
• È indicata la reattività crociata con il Neurofilamento H di topo e ratto, consentendo l'uso in modelli roditori; tuttavia, è raccomandato l'allineamento della sequenza della regione epitopica nelle specie bersaglio.

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