Anticorpo Monoclonale Anti-Neurofilamento L per WB, IF, IHC, ELISA - P07196

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Polipeptide Leggero del Neurofilamento

• Il polipeptide leggero del neurofilamento (NEFL) è un membro della famiglia dei filamenti intermedi ed è una delle tre principali proteine dei neurofilamenti che includono anche NEFM e NEFH, le quali insieme mantengono il calibro neuronale e la struttura assonale.
• NEFL coopera con altre proteine neuronali dei filamenti intermedi come la periferina (PRPH) e l'alfa-internexina (INA) per formare le reti filamentose essenziali per l'integrità neuronale.
• La proteina è espressa prevalentemente negli assoni, localizzandosi nel citoplasma e nel citoscheletro delle cellule neuronali, e svolge un ruolo critico nella crescita radiale degli assoni.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, glicazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che regolano l'assemblaggio dei filamenti, la stabilità e le interazioni con altri componenti del citoscheletro.
• Le mutazioni nel gene NEFL sono associate a disturbi neurodegenerativi, inclusa la malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 1F e 2E, evidenziando il suo ruolo nel mantenimento assonale e nella suscettibilità alla neuropatia.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 61,5 kDa (calcolato dalla sequenza) e viene spesso rilevata come una banda a 68 kDa mediante SDS-PAGE a causa delle modifiche post-traduzionali.
• NEFL, insieme ad altre subunità dei neurofilamenti, funge da biomarcatore per il danno neuronale in condizioni come la sclerosi multipla, la malattia di Alzheimer e il trauma cranico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 60-250, una regione centrale della proteina NEFL umana, è probabile che l'anticorpo riconosca un epitopo conservato; considerare l'allineamento delle sequenze quando lo si utilizza per specie non umane per confermare la reattività.
• Per il Western blot, può essere osservata una banda vicina a 68 kDa; validare confrontando con il peso molecolare atteso e utilizzando appropriati controlli di caricamento come β-actina o GAPDH.
• Nell'immunofluorescenza, è opportuno testare le condizioni ottimali di fissazione e permeabilizzazione; la fissazione con paraformaldeide seguita da permeabilizzazione con Triton X-100 è comunemente utilizzata per la colorazione dei neurofilamenti.
• Per l'immunoistochimica, i metodi di recupero dell'antigene (ad es., tampone citrato mediato da calore) possono migliorare il rilevamento; includere controlli tissutali positivi e negativi.
• Quando si utilizza l'anticorpo in ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento corrisponda alla regione dell'immunogeno per evitare reattività crociata con altre subunità dei neurofilamenti.

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