Anticorpo Policlonale Anti-Neurofilamento M per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07197

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Neurofilamento M

• Il polipeptide medio del neurofilamento (NFM, NEF3, proteina neurofilamentosa da 160 kDa) è una proteina chiave dei filamenti intermedi nei neuroni.
• Si assembla con NEFL (leggero) e NEFH (pesante) per formare neurofilamenti, essenziali per mantenere il calibro assonale e l'integrità strutturale.
• NFM può anche interagire con altre proteine dei filamenti intermedi neuronali, come la periferina (PRPH) e l'internexina (INA), per creare estese reti filamentose.
• A livello subcellulare, NFM si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro, negli assoni (proiezioni cellulari) e nel pericarion.
• Modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione, acetilazione e metilazione, regolano la dinamica e la funzione dei filamenti di NFM.
• Lo splicing alternativo del gene NEFM produce molteplici isoforme, contribuendo alla diversità funzionale in diversi contesti neuronali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 100-260 di NFM umano, una regione centrale probabilmente conservata, che consente il rilevamento della proteina endogena in campioni umani, di topo e di ratto.
• Per il Western blotting (WB), la banda attesa è di circa 102 kDa; tuttavia, a causa di modificazioni post-traduzionali e isoforme, si possono osservare bande multiple o leggeri spostamenti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunocitochimica (IF/ICC), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate poiché NFM è una proteina del citoscheletro; considerare l'uso di metodi che preservino le strutture filamentose.
• Per l'ELISA, un antigene di rivestimento appropriato e il sistema di rilevamento dovrebbero essere validati; l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o il rilevamento con un accoppiamento adeguato.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, offre un'elevata avidità e riconosce più epitopi, il che può essere vantaggioso per un rilevamento robusto in diverse applicazioni.
• Confermare la specificità includendo controlli appropriati (ad es., linee cellulari o tessuti knockout) e validando, se possibile, contro l'immunogeno.

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