Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Neuropilina-1 (NRP1) per WB, ELISA - O14786

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Neuropilina-1

• La Neuropilina-1 (NRP1) è un recettore multifunzionale di superficie cellulare noto anche come recettore del fattore di crescita endoteliale vascolare 165, CD304 e BDCA4. Lo splicing alternativo produce isoforme con pattern di espressione non sovrapponibili, che contribuiscono alle sue diverse funzioni tessuto-specifiche.
• Si lega alle semaforine di classe 3 (ad esempio SEMA3A) e ai membri della famiglia VEGF (VEGF165, PLGF-2, VEGFB), mediando rispettivamente la chemorepulsione e l'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:10688880, PMID:9288753, PMID:9529250
• NRP1 riconosce un motivo della regola C-terminale (CendR) (R/KXXR/K) sui ligandi, innescando l'internalizzazione cellulare e la perdita di permeabilità vascolare. Riferimenti correlati: PMID:19805273
• La coespressione con VEGFR2/KDR aumenta il legame con VEGF165 e la segnalazione a valle, promuovendo la chemiotassi delle cellule endoteliali e l'angiogenesi.
• Nel sistema nervoso in via di sviluppo, NRP1 guida la proiezione degli assoni dei motoneuroni e la migrazione dei corpi cellulari, inclusa la migrazione dei motoneuroni facciali dal rombomero 4 al 6.
• NRP1 si localizza sulla membrana cellulare e nel citoplasma; è inoltre presente in forma secreta e associata alla membrana mitocondriale, riflettendo il suo ruolo multifunzionale.
• Nei tessuti adulti, NRP1 è altamente espresso nel cuore e nella placenta, moderatamente in polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas, e a bassi livelli nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:10688880, PMID:9529250

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 824–923 all'interno del dominio C-terminale di NRP1 umana. Questa regione è conservata nel topo e nel ratto, in linea con la reattività crociata riportata. Verifica l'allineamento della sequenza nella specie di interesse prima di iniziare gli esperimenti.
• Per l'analisi Western blot (WB), è attesa una banda vicino a 103 kDa per la NRP1 full-length. Si consiglia di utilizzare protocolli di estrazione delle proteine di membrana e condizioni riducenti, poiché NRP1 forma dimeri legati da disolfuro e può presentare strutture di ordine superiore. Convalidare la specificità con controlli appropriati (ad esempio, competizione peptidica o knockdown).
• Per ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; titolare le condizioni utilizzando NRP1 ricombinante o campioni positivi noti e includere controlli negativi per stabilire la sensibilità e il intervallo dinamico del test.
• Possono comparire bande aggiuntive dovute all'eterogeneità delle isoforme, alla glicosilazione o alle modifiche dei proteoglicani; se necessario, confermare l'identità della banda mediante spettrometria di massa o reagenti specifici per le isoforme.
• Conservare a -20°C o a temperatura inferiore dopo l'arrivo ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere le prestazioni.

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