Anticorpo Monoclonale Anti-Elastasi Neutrofila (ELANE) per WB, IP, ELISA - P08246

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Elastasi Neutrofila (ELANE)

• L'elastasi neutrofila (ELANE), nota anche come proteasi serina del midollo osseo, elastasi-2, elastasi dei leucociti umani (HLE), medullasina ed elastasi PMN, è una proteasi serina codificata dal gene ELANE.

• Modifica le funzioni delle cellule natural killer, dei monociti e dei granulociti. Riferimenti correlati: PMID:15140022

• Esibisce attività microbicida clivando proteine batteriche; digerisce la proteina di membrana esterna A (ompA) in E. coli e K. pneumoniae, contribuendo all'uccisione di questi batteri in vitro. Riferimenti correlati: PMID:10947984, PMID:25161283

• Critica per la formazione delle trappole extracellulari dei neutrofili (NET) translocandosi nel nucleo, degradando l'istone H4 e facilitando la decondensazione della cromatina. Le NET intrappolano i patogeni durante l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:20974816, PMID:25066128, PMID:28574339

• Inibisce il rilascio di enzimi neutrofili dipendenti da C5a e la chemiotassi. Riferimenti correlati: PMID:15140022

• Promuove la coagulazione del sangue e l'aggregazione piastrinica clivando l'inibitore della via del fattore tissutale (TFPI) e attivando l'integrina alfa-IIb/beta-3. Riferimenti correlati: PMID:20676107, PMID:25211214, PMID:9111081

• Cliva GSDMB, inibendo la piroptosi. Riferimenti correlati: PMID:36899106

• Localizzata subcellolarmente in vescicole citoplasmatiche, fagosomi, lisosomi, granuli citolitici e nel nucleo. Espressione tessuto-specifica nelle cellule del midollo osseo e nei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:10947984

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico del dominio catalitico (aa 167-267), suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce la forma matura attiva di ELANE. Validare la specificità utilizzando proteine ricombinanti o lisati cellulari che esprimono ELANE attiva.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 29 kDa; notare che lo zimogen non elaborato può apparire a un peso molecolare superiore. Confermare l'identità della banda con controlli appropriati.
• Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP), considerare la potenziale preferenza dell'anticorpo per la forma attiva dell'enzima, rilevante per studiare le interazioni e i complessi della proteasi.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Considerare l'abbinamento con un altro anticorpo specifico per ELANE per lo sviluppo di ELISA a sandwich.

Data l'attività proteolitica di ELANE, evitare incubazioni prolungate a 37°C senza inibitori della proteasi per prevenire l'autodegradazione e la potenziale perdita di segnale.

• La reattività crociata è riportata solo per l'uomo; testare la reattività in altre specie se richiesto dal modello sperimentale.

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