Anticorpo Monoclonale Anti-NF-kB p65/RelA per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP - Q04206

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NF-kB p65/RelA

• La subunità NF-kB p65 (nota anche come RELA, NFKB3) è un componente centrale del complesso del fattore di trascrizione NF-kappa-B, un regolatore pleiotropico presente in quasi tutti i tipi cellulari.
• I complessi NF-kappa-B sono omodimeri o eterodimeri formati da proteine contenenti domini di tipo REL; l'eterodimero di RELA e NFKB1 (p50) è la forma più abbondante e agisce come attivatore trascrizionale.
• RELA/p65 svolge un ruolo centrale nelle risposte infiammatorie e immunitarie, nonché nella differenziazione cellulare, proliferazione, apoptosi e tumorigenesi, legandosi ai siti kappa-B nei promotori dei geni bersaglio.
• Nelle cellule non stimolate, i dimeri NF-kappa-B vengono trattenuti nel citoplasma da inibitori (I-kappa-B); dopo l'attivazione, I-kappa-B viene fosforilato e degradato, permettendo a RELA di traslocare nel nucleo per regolare l'espressione genica.
• RELA è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, metilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinazione, che regolano finemente la sua attività, stabilità e interazioni.
• RELA è essenziale per l'espressione dei geni delle citochine nelle cellule T, come dimostrato da studi funzionali. Riferimenti correlati: PMID:15790681
• RELA è stato identificato come un fattore di trascrizione chiave che regola la risposta all'interferone durante l'infezione da SARS-CoV-2. Riferimenti correlati: PMID:33440148
• La proteina è localizzata principalmente nel nucleo e nel citoplasma, con un traslocco dinamico tra questi compartimenti a seconda dello stato di attivazione.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per il Western blot (WB), è prevista una banda specifica intorno a 60 kDa, coerente con il peso molecolare calcolato di NF-kB p65.
• Per IHC-P e IF/ICC, si consiglia la convalida nel tessuto o sistema cellulare pertinente; potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene per le sezioni incluse in paraffina.
• I dati di convalida KO indicano la specificità per RELA endogena; si consiglia agli utenti di includere controlli appropriati (es. lisati di cellule knockout) nei loro esperimenti.
• Negli saggi ChIP, l'anticorpo riconosce NF-kB p65 nativo legato alla cromatina; le condizioni ottimali di fissazione e frammentazione dovrebbero essere determinate empiricamente.
• Sebbene l'anticorpo sia indicato per più applicazioni, le condizioni individuali del saggio (es. diluizione, tempo di incubazione) dovrebbero essere ottimizzate nel laboratorio dell'utente finale.

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