Anticorpo policlonale rabbit Anti-NF-kB p65/RelA per WB - Q04206

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NF-kB p65/RelA

• NF-kB p65/RelA, codificato dal gene RELA, è una subunità del complesso del fattore di trascrizione NF-kB che esiste come omodimero o eterodimero; il complesso eterodimerico p65-NFKB1 è la forma più abbondante.
• Svolge un ruolo centrale nell'infiammazione, nell'immunità, nella crescita cellulare, nella differenziazione e nell'apoptosi legandosi ai siti kappa-B nei promotori dei geni bersaglio, agendo principalmente come attivatore trascrizionale.
• Tra i membri della famiglia NF-kB (RELA, RELB, REL, NFKB1, NFKB2), p65/RelA è essenziale per l'espressione genica delle citochine nei linfociti T (PubMed:15790681). Riferimenti correlati: PMID:15790681
• La localizzazione subcellulare di p65 è strettamente regolata; nelle cellule a riposo è sequestrato nel citoplasma dagli inibitori IκB e, dopo l'attivazione, si trasloca nel nucleo.
• p65/RelA è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua attività trascrizionale e la sua stabilità.
• È anche coinvolto nelle interazioni ospite-virus, agendo come fattore di trascrizione chiave che regola la risposta interferonica durante l'infezione da SARS-CoV-2 (PubMed:33440148). Riferimenti correlati: PMID:33440148
• La proteina ha un peso molecolare previsto di circa 60 kDa (UniProt: 60219 Da) ed è espressa in quasi tutti i tipi cellulari.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio di transattivazione C-terminale (aa 450-551) di p65/RelA umano; la reattività dell'anticorpo può essere influenzata dalle modifiche post-traduzionali presenti in questa regione.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda intorno a 60 kDa; si consiglia di includere controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, cellule stimolate rispetto a cellule non stimolate) per confermare la specificità.
• Nell'immunoprecipitazione, la natura policlonale può garantire un recupero robusto; convalidare nel sistema di campioni pertinente per confermare l'efficiente cattura del complesso p65.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, aspettarsi la traslocazione nucleare dopo l'attivazione della via di NF-κB; utilizzare condizioni di fissazione e permeabilizzazione adatte per antigeni nucleari.
• Questo anticorpo è raccomandato per ELISA; verificare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevamento con p65 ricombinante o lisati cellulari.

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