Anticorpo monoclonale di coniglio anti-NF-κB2 (fosfo S866+S870) per WB, IHC-P, ELISA - Q00653

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NF-κB2

• NF-κB2 codifica la proteina precursore p100, che subisce un processamento proteasomiale per generare la subunità attiva legante il DNA p52; nomi alternativi includono LYT10, H2TF1 e p49/p100.
• NF-κB2 è un componente centrale della famiglia di fattori di trascrizione NF-κB, forma eterodimeri con RELB che attivano l'espressione genica, o omodimeri p52 che reprimono la trascrizione, in risposta a stimoli immunitari e infiammatori.
• p100 funge da inibitore citoplasmatico di NF-κB trattenendo le proteine associate; la sua fosforilazione alle serina 866 e 870 innesca il processamento dipendente da ubiquitina in p52, consentendo la traslocazione nucleare.
• La via NF-κB non canonica si basa sulla fosforilazione di p100 mediata da MAP3K14/CHUK per produrre complessi p52-RELB, che regolano geni coinvolti nell'organogenesi linfoide, nella sopravvivenza delle cellule B e nella tumorigenesi.
• NF-κB2 è implicato in riarrangiamenti cromosomici nei linfomi (da qui la designazione di oncogene LYT10) ed è associato a malattie da immunodeficienza primaria (ad es., CVID10).
• Nell'orologio circadiano, NF-κB2 reprime l'attività trascrizionale di CLOCK-BMAL1, collegando la segnalazione infiammatoria ai ritmi biologici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico che comprende S866 e S870 di NF-κB2 umano; si prevede che la reattività dell'anticorpo sia specifica per le forme fosforilate di p100 e p52.
• Per il Western blot, trattare le cellule target con attivatori della via non canonica (ad es., CD40L o linfotossina β) per indurre fosforilazione e processamento. Possono essere rilevate bande vicino a 97 kDa (p100) e 52 kDa (p52).
• Utilizzare inibitori della fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione. Per IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e convalidare la colorazione con controlli tissutali appropriati.

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