Anticorpo policlonale di coniglio anti-NFIL3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q16649

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NFIL3

• NFIL3 (proteina regolata dal fattore nucleare dell'interleuchina-3), nota anche come E4BP4, IL3BP1, NFIL3A o NF-IL3A, è un regolatore trascrizionale codificato dal gene NFIL3 nell'uomo (GeneID: 4783). Riconosce e si lega alla sequenza 5'-[GA]TTA[CT]GTAA[CT]-3', presente in numerosi promotori cellulari e virali.
• Agisce sia come repressore sia come attivatore trascrizionale. Reprime la trascrizione dai promotori contenenti siti ATF e compete con i fattori PAR che legano il DNA (DBP, HLF, TEF) per lo stesso sito consenso. Attiva la trascrizione dal promotore dell'interleuchina-3 nelle cellule T.
• NFIL3 è un componente fondamentale dell'orologio circadiano e funziona come regolatore negativo dell'espressione di PER2, influenzando così l'oscillazione circadiana.
• È localizzato a livello subcellulare nel nucleo, in accordo con il suo ruolo di fattore trascrizionale. È espresso in diversi tessuti, tra cui vescica, stomaco, tiroide, midollo spinale, linfonodi, trachea, ghiandola surrenale, midollo osseo e muscolo.
• È soggetto a modifiche post-traduzionali mediante fosforilazione e ubiquitinazione (legame isopeptidico, coniugazione Ubl), che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• Svolge un ruolo nello sviluppo delle cellule immunitarie; protegge le cellule pro-B dall'apoptosi ed è necessario per lo sviluppo dei precursori delle cellule natural killer.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 133-462 di NFIL3 umano, coprendo un'ampia porzione della proteina. Questa regione include il dominio di legame al DNA e probabilmente motivi funzionali critici, rendendo l'anticorpo adatto al rilevamento di NFIL3 a lunghezza intera.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di 51 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati, ad esempio lisati di tessuti con elevata espressione di NFIL3 come linfonodi o midollo osseo, e verificare la specificità della banda utilizzando campioni sottoposti a knockdown o knockout, se disponibili.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), assicurarsi di eseguire un'adeguata fissazione e permeabilizzazione per consentire l'accesso a NFIL3 nucleare. Includere una controcolorazione nucleare per confermarne la localizzazione.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo secondario ottimizzato per il rilevamento di anticorpi policlonali di coniglio. Validare le condizioni del test utilizzando la proteina NFIL3 ricombinante o lisati cellulari.
• Poiché l'anticorpo presenta reattività crociata con NFIL3 di ratto, può essere utilizzato per studi interspecifici; tuttavia, confermare sempre la reattività nel proprio specifico sistema sperimentale.

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