Anticorpo monoclonale coniglio anti-NG2/CSPG4 per WB, ELISA - Q6UVK1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NG2/CSPG4

• Il proteoglicano di condroitina solfato 4 (NG2/CSPG4), noto anche come proteoglicano di condroitina solfato del melanoma, è un grande proteoglicano di membrana integrale coinvolto nella proliferazione cellulare, nella migrazione e nella morfogenesi microvascolare.
• Funziona come recettore di superficie cellulare per il collagene alfa 2(VI), facilitando la migrazione cellulare su substrati ricchi di collagene. NG2/CSPG4 si lega ai fattori di crescita e alle proteasi della matrice extracellulare, modulando la loro attività e contribuendo all'invasione delle cellule del melanoma attraverso la degradazione del collagene di tipo I dipendente da MPP16.
• A livello subcellulare, NG2/CSPG4 si localizza sulla membrana cellulare, sulla membrana apicale, sulla membrana del lamellipodio e sulla superficie cellulare, coerente con i ruoli nella polarità cellulare, nell'adesione e nella migrazione.
• L'espressione tissutale è prominente nelle cellule del melanoma maligno ed è rilevata anche nei fibroblasti e nella placenta a livello proteico. Riferimenti correlati: PMID:36213313 PMID:32337544
• Come trasduttore di segnali, il dominio citoplasmatico recluta proteine di impalcatura e di segnalazione, promuovendo la formazione di fibre di retrazione, la polarizzazione cellulare tramite GTPasi Rho e l'adesione mediata da integrina attraverso le cascate CDC42, ACK1 e BCAR1. Attiva anche le vie FAK ed ERK1/ERK2.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono ponti disolfuro, un dominio transmembrana e molteplici siti di glicosilazione/fosforilazione, classificandolo come glicoproteina e fosfoproteina coinvolta nell'angiogenesi, nei processi di sviluppo e nel rimodellamento tissutale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1340–1563 vicino alla regione extracellulare C‑terminale; pertanto, ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la proteina NG2/CSPG4 intera di ~251 kDa nel western blot. Convalidare il rilevamento in linee cellulari di melanoma umano (es. A375) o in cellule trasfette con CSPG4.
• Per l'ELISA, considerare l'uso di frammenti del dominio extracellulare CSPG4 ricombinante o lisati cellulari totali da cellule che esprimono CSPG4. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e di rilevamento in base al formato specifico del saggio.
• Dato l'elevato peso molecolare, utilizzare un gel SDS‑PAGE al 6–8% e un tempo di trasferimento esteso per il western blot per garantire un trasferimento efficiente del grande proteoglicano.

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