Anticorpo policlonale di coniglio anti-NG2/CSPG4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q6UVK1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NG2/CSPG4

• NG2/CSPG4 è un proteoglicano del solfato di condroitina, noto anche come proteoglicano del solfato di condroitina del melanoma (MCSP), codificato dal gene CSPG4. È una grande proteina transmembrana con un dominio extracellulare contenente catene di glicosaminoglicani del solfato di condroitina.
• Funziona come recettore della superficie cellulare per il collagene alfa 2(VI) e vari fattori di crescita, modulando la proliferazione cellulare, la migrazione e la morfogenesi microvascolare. Inibisce inoltre la crescita dei neuriti e il collasso del cono di crescita durante la rigenerazione assonale.
• Svolge un ruolo critico nell'invasione delle cellule del melanoma regolando la degradazione del collagene di tipo I dipendente da MPP16 e potenziando l'attivazione del plasminogeno, inibendo al contempo l'angiostatina e promuovendo così il rimodellamento tissutale e l'angiogenesi.
• Agisce come trasduttore del segnale attraverso il suo C-terminale citoplasmatico, interagendo con proteine di impalcatura e di segnalazione per promuovere la formazione di fibre di retrazione, la polarizzazione cellulare e l'adesione mediata dalle integrine attraverso le vie della GTPasi Rho, CDC42, ACK1 e BCAR1.
• Attiva le cascate di segnalazione FAK ed ERK1/ERK2, contribuendo alla diffusione e alla migrazione cellulare.
• Si localizza principalmente nella membrana cellulare, inclusi la membrana apicale cellulare, la membrana del lamellipodio e le proiezioni della superficie cellulare.
• È rilevato a livello proteico nei fibroblasti, nella placenta e nelle cellule del melanoma maligno, sottolineandone l'importanza nella progressione del cancro e nei processi di sviluppo.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, formazione di legami disolfuro e glicosilazione N-linked. Presenta un'elica transmembrana e un peptide segnale, classificandosi come proteoglicano transmembrana di tipo I.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 1950–2210) si trova nel dominio citoplasmatico; pertanto, l'anticorpo può rilevare sia le forme complete sia quelle troncate di CSPG4 nel western blot.
• A causa dell'elevato peso molecolare (~251 kDa), si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE a bassa percentuale (ad esempio, 6%) e tempi di trasferimento prolungati per ottenere risultati ottimali nel WB.
• Per l'IHC-P, può essere necessario il recupero antigenico indotto dal calore per esporre l'epitopo nei tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina.
• Nell'IF/ICC, le fasi di permeabilizzazione sono essenziali per consentire all'anticorpo di raggiungere l'epitopo intracellulare.
• La reattività crociata confermata con il topo consente studi comparativi, ma si raccomanda la validazione nel sistema campione specifico a causa delle potenziali differenze dipendenti dalla specie.
• Quando si progettano saggi ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di cattura diretto contro un epitopo extracellulare può consentire di ottenere immunodosaggi sandwich efficaci.

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