Anticorpo monoclonale Anti-NGLY1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96IV0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NGLY1

• NGLY1 (Peptide-N(4)-(N-acetil-beta-glucosaminil)asparagine ammidasi), noto anche come N-glicanasi 1 o PNGase, è un enzima citoplasmatico responsabile della deglicosilazione di glicoproteine N-linked misfoidate.
• Cleava specificamente il legame β-aspartil-glucosammina (GlcNAc), convertendo l'asparagine in acido aspartico, e mostra una preferenza per gli oligosaccaridi ad alto contenuto di mannosio rispetto a quelli di tipo complesso.
• NGLY1 svolge un ruolo fondamentale nella degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD) riconoscendo le glicoproteine misfoidate esportate dall'ER nel citosol, rendendole substrati per la degradazione proteasomiale.
• L'enzima è una metalloproteina legante lo zinco, dove il legame con il metallo è essenziale per la sua attività idrolasica.
• NGLY1 è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, e subisce splicing alternativo.
• Dal punto di vista subcellulare, NGLY1 si localizza nel citoplasma, coerentemente con la sua funzione nel controllo di qualità delle proteine citoplasmatiche.
• Le mutazioni in NGLY1 sono associate alla deficienza di NGLY1, una malattia congenita della deglicosilazione (CDDG), che sottolinea l'importanza della proteina nel mantenimento della proteostasi cellulare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato copre la regione N-terminale (aa 1-300) di NGLY1 umano, e può favorire la rilevazione delle isoforme full-length e potenzialmente troncate.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 74 kDa; si consiglia di utilizzare campioni freschi con inibitori di proteasi per prevenire la degradazione.
• Questo anticorpo è stato validato dal fornitore per WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA; ogni applicazione può richiedere l'ottimizzazione individuale della preparazione dei campioni e della diluizione dell'anticorpo.
• È riportata la reattività crociata con topo e ratto; verificare la reattività nel vostro sistema sperimentale, poiché la conservazione dell'epitopo può variare tra i tessuti.
• Poiché NGLY1 funziona nel citoplasma, la frazionamento subcellulare o buffer di lisi specifici possono migliorare la rilevazione in immunofluorescenza (IF/ICC).

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