Anticorpo Policlonale Anti-NGLY1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q96IV0

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NGLY1

• NGLY1 (N-glicanasi 1) è una peptide:N-glicanasi citoplasmatica che catalizza la scissione dei glicani N-linked da glicoproteine denaturate, convertendo l'asparagina in acido aspartico.
• Prende di mira preferenzialmente le proteine con oligosaccaridi ad alto contenuto di mannosio rispetto ai glicani di tipo complesso e agisce specificamente sulle proteine misfaldate retrotranslocate dal reticolo endoplasmatico al citosol, lasciando intatte le proteine native.
• La deglicosilazione mediata da NGLY1 è un passaggio necessario per la degradazione mediata dal proteasoma di alcune glicoproteine misfaldate, collegando l'enzima alla via di degradazione associata all'ER (ERAD).
• L'enzima è una metalloproteasi zinco-dipendente (parola chiave: Legame metalli; Zinco) ed è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, il che suggerisce l'esistenza di meccanismi regolatori.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, che possono avere proprietà funzionali o distribuzioni tissutali diverse.
• La struttura tridimensionale della proteina è stata determinata (parola chiave: struttura 3D), fornendo informazioni sul suo meccanismo catalitico e sul riconoscimento del substrato.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è 74 kDa; valutare di ottimizzare la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento per ottenere una separazione chiara.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, la permeabilizzazione può essere necessaria per rilevare la proteina NGLY1 citoplasmatica; validare la colorazione in cellule con livelli di espressione noti.
• Negli assay ELISA, testare diverse concentrazioni di antigene di rivestimento e diluizioni dell'anticorpo; includere campioni di controllo positivo e negativo per garantire la specificità.
• Data la natura policlonale, è possibile una variabilità tra lotti; si consiglia di validare ogni nuovo lotto nell'applicazione e nel sistema di campioni previsto.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; conservare nelle condizioni consigliate per mantenere la stabilità dell'anticorpo.

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