Anticorpo Policlonale Anti-NHP2 per WB, ELISA - Q9NX24

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NHP2

• La sottounità 2 del complesso ribonucleoproteico H/ACA (NHP2), nota anche come membro 2 della famiglia delle proteine nucleolari (NOLA2) o proteina snoRNP NHP2, è un componente fondamentale del complesso ribonucleoproteico nucleolare piccolo (snoRNP) H/ACA.
• NHP2 è essenziale per la biogenesi dei ribosomi e la manutenzione dei telomeri. All'interno dello snoRNP H/ACA, catalizza la pseudouridilazione dell'rRNA, convertendo l'uridina in pseudouridina isomerizzando il legame del ribosio da N1 a C5. Ogni rRNA può contenere fino a 100 residui di pseudouridina, che contribuiscono a stabilizzare la conformazione dell'rRNA.
• La proteina è anche implicata nel corretto processamento e nel traffico intranucleare di TERC, il componente RNA dell'oloenzima trascrittasi inversa telomerica (TERT), influenzando così l'omeostasi dei telomeri.
• A livello subcellulare, NHP2 si localizza nel nucleo, dove è arricchito nei nucleoli e nei corpi di Cajal, in coerenza con i suoi ruoli nella modifica dell'rRNA e nella maturazione dell'RNA telomerasico.
• NHP2 è ampiamente espresso nei tessuti umani, inclusi cervello, colon, cuore, rene, ovaio, pancreas, placenta, prostata, muscolo scheletrico, intestino tenue, milza, testicolo e timo, con livelli relativamente più bassi nel fegato.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e la formazione di legami isopeptidici (coniugazione Ubl). Le mutazioni in NHP2 sono associate alla Discheratosi congenita, una disturbo della biologia dei telomeri caratterizzato da insufficienza midollare, anomalie cutanee e predisposizione al cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo policlonale è stato generato contro una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 1–153 di NHP2 umano; si prevede che riconosca il NHP2 a lunghezza intera. È riportata la reattività incrociata con NHP2 di ratto; si consiglia di verificare la reattività in altre specie di interesse.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto di NHP2 è di circa 17 kDa. Utilizzare composizioni di gel appropriate (es. 12–15% SDS‑PAGE) e condizioni di trasferimento per proteine a basso peso molecolare.
• Nelle applicazioni ELISA, le concentrazioni ottimali dell'antigene di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo di rilevamento devono essere determinate empiricamente. Considerare l'uso di NHP2 ricombinante o lisati cellulari come controlli positivi.
• Essendo una proteina nucleare/nucleolare, la preparazione del campione per WB dovrebbe includere un efficace arricchimento nucleare o l'uso di tamponi di lisi appropriati per solubilizzare NHP2.
• Non sono forniti dati quantitativi sulle prestazioni; convalidare sempre l'anticorpo nel proprio sistema sperimentale specifico con controlli appropriati.

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