Anticorpo policlonale coniglio anti-NIFK per WB e ELISA - Q9BYG3

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NIFK

• NIFK, noto anche come fosfoproteina nucleolare Nopp34 o MKI67IP, è una proteina legante l'RNA che interagisce specificamente con il dominio forkhead-associated (FHA) del marcatore di proliferazione Ki-67.
• È localizzato prevalentemente nel nucleolo durante l'interfase e si associa ai cromosomi durante la mitosi, riflettendo il suo ruolo nelle funzioni nucleolari dipendenti dal ciclo cellulare.
• La proteina è coinvolta nella biogenesi dei ribosomi e nella elaborazione del pre-rRNA, contribuendo alla regolazione della crescita e della proliferazione cellulare.
• Le modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, modulano la sua attività e le sue interazioni all'interno dell'ambiente nucleolare.
• NIFK è un membro ben caratterizzato del proteoma di riferimento con prove dirette di sequenziamento proteico, che ne confermano l'espressione e la conservazione nelle cellule umane.
• L'isoforma canonica ha un peso molecolare calcolato di circa 34 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 180–260, una regione che potrebbe essere strutturata e accessibile; considerare le condizioni di esposizione dell'epitopo per un legame ottimale dell'anticorpo.
• Per il western blot, prevedere una banda intorno a 34 kDa nei lisati cellulari totali; i protocolli di arricchimento nucleolare possono aumentare l'intensità del segnale data la localizzazione subcellulare della proteina.
• È stata dimostrata la reattività crociata con topo e ratto; validare la sensibilità di rilevamento nelle specie e nei tipi di tessuti pertinenti, specialmente quelli con alta attività proliferativa.
• Per l'ELISA, la natura policlonale fornisce un ampio riconoscimento degli epitopi; testare a più diluizioni e con controlli appropriati per stabilire la linearità e la specificità.
• L'anticorpo è adatto per studiare la dinamica del ciclo cellulare e le risposte allo stress nucleolare; combinare con Ki-67 o altri marcatori nucleolari per studi di co-localizzazione.

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