Anticorpo policlonale coniglio Anti-NINL per WB e ELISA - Q9Y2I6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NINL

• NINL (proteina simile a Ninein), indicata anche come NLP, è codificata dal gene NINL (KIAA0980 nell'uomo ed è implicata nell'organizzazione dei microtubuli e nella funzione del centrosoma.
• Nelle cellule in interfase, NINL partecipa all'organizzazione dei microtubuli; la sua sovraespressione causa la frammentazione dell'apparato di Golgi, la dispersione periferica dei lisosomi e interferisce con l'assemblaggio del fuso mitotico.
• La proteina è anche coinvolta nel trasporto vescicolare all'interno delle cellule fotorecettrici (per similarità) e può contribuire alla carcinogenesi ovarica.
• NINL si localizza principalmente al centrosoma, il principale centro di organizzazione dei microtubuli, ed è distribuita in tutto il citoplasma.
• I modelli di espressione dipendono dal ciclo cellulare, con livelli proteici che raggiungono il picco durante la fase G2/M; l'espressione è osservata in specifiche linee cellulari di carcinoma (ad esempio KYSE-150, HeLa, U2OS) nonché in tessuti fetali e adulti tra cui cuore, muscolo scheletrico, fegato, polmone, coclea, cervello, testicolo, rene e retina.
• Le caratteristiche strutturali e regolatorie chiave includono lo splicing alternativo, domini di legame del calcio e dei metalli, motivi a coil avvolti e modifiche post-traduzionali come fosforilazione e ubiquitinazione, che riflettono i suoi diversi ruoli cellulari.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–190) della NINL umana, il che suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere epitopi all'interno di questo dominio; si consiglia di verificare la reattività con le isoforme di NINL note prodotte da splicing alternativo.
• Per il Western blotting, convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari umani e di topo dati la reattività crociata riportata; ci si aspetta una banda vicino al peso molecolare previsto di circa 156 kDa.
• Nell'ELISA, utilizzare la proteina NINL ricombinante come standard per l'ottimizzazione del rivestimento e per valutare l'affinità dell'anticorpo; includere controlli negativi appropriati per confermare la specificità.
• A causa dell'espressione dipendente dal ciclo cellulare, se si necessita di una rivelazione migliorata, considerare di sincronizzare le popolazioni cellulari o raccogliere campioni nella fase G2/M.

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