Anticorpo monoclonale coniglio anti-NLK per WB, IHC-P, ELISA - Q9UBE8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della NLK

• NLK (Nemo-like kinase) è una chinasi proteica serina/treonina e membro della famiglia delle chinasi, nota anche come LAK1. Contiene siti di legame dell'ATP e di legame metallico tipici delle chinasi proteiche.
• Nella via Wnt non canonica, NLK agisce come un effettore positivo a valle di WNT5A, TAK1 e HIPK2, influenzando la determinazione del destino cellulare. Riferimenti correlati: PMID:15004007, PMID:15764709
• NLK regola negativamente la segnalazione Wnt/β-catenina canonica fosforilando TCF7L2/TCF4 e LEF1, risultando nella dissociazione dal DNA e nella proteolisi di LEF1, sopprimendo così l'espressione dei geni bersaglio di Wnt. Riferimenti correlati: PMID:12482967, PMID:21454679
• Funziona come regolatore negativo della segnalazione Notch attraverso la fosforilazione di NOTCH1, bloccando l'assemblaggio del complesso ternario trascrizionalmente attivo. Riferimenti correlati: PMID:20118921
• NLK fosforila e destabilizza i fattori di trascrizione della famiglia MYB (MYB, MYBL1, MYBL2), inibendo la loro attività trascrizionale promuovendo la proteolisi o interrompendo il legame dei coattivatori. Riferimenti correlati: PMID:15082531
• Nella segnalazione IL6/IL1B, NLK fosforila STAT3 e coopera con ATF5 per potenziare l'attività trascrizionale di C/EBP, stabilizzando anche i livelli proteici di ATF5. Riferimenti correlati: PMID:15004007, PMID:15764709, PMID:25512613
• Sotto stress osmotico, NLK fosforila RPTOR, inibendo il reclutamento lisosomiale di mTORC1 e la segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:26588989
• NLK si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, dove modula l'attività dei fattori di trascrizione e la trasduzione del segnale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli aminoacidi 400-500 di NLK umano; questo può fornire un'elevata specificità nelle applicazioni pertinenti.
• Per il Western blot, il peso molecolare atteso è di circa 58 kDa; considerare controlli positivi e negativi appropriati (es. linee cellulari che esprimono NLK).
• Per l'immunoistochimica (paraffina), il recupero dell'antigene e l'ottimizzazione della titolazione dell'anticorpo possono migliorare la colorazione; validare in tessuti noti per esprimere NLK.
• Le prestazioni ELISA dipendono dal formato del test; considerare impostazioni dirette o indirette con agenti di bloccaggio adatti.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, è compatibile con anticorpi secondari anti-IgG di coniglio; minimizzare la reattività crociata con altre specie.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; conservare secondo le raccomandazioni del fornitore.

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