Anticorpo policlonale di coniglio anti-NLRP3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q96P20

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NLRP3

• NLRP3 agisce come componente sensore dell'inflammasoma NLRP3, avviando l'assemblaggio del complesso con PYCARD/ASC e CASP1, con conseguente scissione mediata dalla caspasi-1 e secrezione delle citochine pro-infiammatorie IL1B e IL18, nonché piroptosi mediata da GSDMD.
  Riferimenti correlati: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:18604214, PMID:27432880, PMID:23582325, PMID:28847925, PMID:31189953

• L'attivazione dell'inflammasoma induce anche il rilascio extracellulare di HMGB1, amplificando le risposte infiammatorie.
  Riferimenti correlati: PMID:22801494

• In condizioni di riposo, NLRP3 viene mantenuto in uno stato autoinibito mediante il legame con ADP.
  Riferimenti correlati: PMID:35114687

• Un'ampia gamma di segnali di pericolo può attivare NLRP3, tra cui ATP extracellulare, nigericina, specie reattive dell'ossigeno, cristalli di urato monosodico, cristalli di colesterolo, fibre di beta-amiloide e particolato ambientale.
  Riferimenti correlati: PMID:16407889, PMID:18403674, PMID:18604214

• Al momento dell'attivazione, NLRP3 viene reclutato presso il centro di organizzazione dei microtubuli (MTOC) e successivamente presso la membrana della rete trans-Golgi dispersa (dTGN), dove si lega al fosfatidilinositolo 4-fosfato e assembla l'inflammasoma attivo.
  Riferimenti correlati: PMID:36442502, PMID:39173637, PMID:30487600, PMID:34554188

• NLRP3 presenta un'attività ATPasica intrinseca.
  Riferimenti correlati: PMID:17483456

• Oltre al suo ruolo nella formazione dell'inflammasoma, NLRP3 può agire come fattore di trascrizione, regolando la differenziazione delle cellule Th2 e l'espressione dei geni delle citochine (per similarità).

• A livello subcellulare, NLRP3 è localizzato nel citosol, nell'inflammasoma, nella membrana dell'apparato di Golgi, nei mitocondri, nel reticolo endoplasmatico e nel nucleo; può inoltre essere secreto.

• L'espressione tissutale è particolarmente evidente nei macrofagi, nelle cellule dendritiche e nelle cellule B e T; NLRP3 è inoltre presente nelle cellule epiteliali polmonari, nei condrociti, negli epiteli pavimentosi stratificati e negli osteoblasti.
  Riferimenti correlati: PMID:33231615, PMID:34133077, PMID:11786556, PMID:17164409, PMID:23229815, PMID:12032915, PMID:17907925

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1-220), comprendente il dominio PYRIN, suggerendo la reattività con la proteina NLRP3 a lunghezza intera.
• Per il Western blot, il peso molecolare calcolato è di circa 118 kDa; utilizzare gel di acrilammide a bassa percentuale e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine di grandi dimensioni.
• Nell'IF/ICC, NLRP3 può presentare pattern di colorazione citoplasmatica e puntiforme perinucleare; includere controlli appropriati e validare la diluizione dell'anticorpo primario.
• Questo anticorpo policlonale è applicabile all'ELISA; nello sviluppo di saggi sandwich, si raccomanda un'attenta combinazione con un anticorpo di rilevazione e si dovrebbe valutare la reattività crociata.

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