Anticorpo policlonale Anti-NLRP5 per WB, ELISA - P59047

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NLRP5

• NLRP5 (proteina contenente domini NACHT, LRR e PYD 5), noto anche come MATER, NALP5, PAN11, PYPAF8 e CLR19.8, è un membro della famiglia dei recettori NOD-simili (NLR) e un componente chiave del complesso materno subcorticale (SCMC), essenziale per lo sviluppo embrionale precoce.
• Il SCMC funziona come componente strutturale delle reti citoplasmatiche negli ovociti e negli embrioni preimpianto, immagazzinando le proteine materne critiche per la riprogrammazione epigenetica e prevenendone la degradazione o l'attivazione prematura.
• NLRP5 è necessario per la corretta localizzazione dei granuli corticali alla corteccia dell'ovocita tramite associazione con lo scheletro di actina corticale, e facilita la rimozione dell'actina corticale prima dell'esocitosi dell'ovocita per prevenire la polispermia.
• È coinvolto nella regolazione del rilascio di Ca2+ e dell'immagazzinamento reticolare endoplasmatico dopo la fecondazione, nonché nella localizzazione dei mitocondri nel citoplasma e nella regione perinucleare negli ovociti e negli embrioni precoci, indipendentemente dal suo ruolo nella formazione delle reti citoplasmatiche.
• Subcellularmente si localizza nel citoplasma, nelle vescicole citoplasmatiche (inclusi i granuli corticali), nei mitocondri, nel nucleolo e nell'apparato di Golgi, riflettendo i suoi molteplici ruoli nella maturazione dell'ovocita e nello sviluppo embrionale.
• È altamente espresso negli ovociti e negli embrioni precoci, con una espressione più bassa nei tessuti somatici come fegato e midollo spinale; è rilevabile anche nelle cellule del cumulo. Riferimenti correlati: PMID:19542546 PMID:11925379 PMID:30877238
• Contiene domini caratteristici tra cui un PYD (dominio pirina), un dominio NACHT con sito di legame ATP e ripetizioni ricche di leucina (LRR), che lo classificano come membro della sottofamiglia NLRP; è elencato nei database con parole chiave come legame ATP, ripetizione ricca di leucina e variante patologica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione compresa tra gli amminoacidi 157-256 della proteina NLRP5 umana (NP_703148.4); l'omologia di sequenza tra le specie può supportare la reattività crociata con topo e ratto, ma si raccomanda la validazione nel tipo di campione specifico.
• Per Western blot, il peso molecolare previsto di NLRP5 è di circa 134 kDa; assicurare condizioni di trasferimento ottimali per proteine ad alto peso molecolare (ad esempio, tempi di trasferimento prolungati, gel SDS-PAGE a bassa percentuale).
• Nelle applicazioni ELISA, rivestire con l'antigene bersaglio e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo per ottenere un intervallo di rilevazione lineare adatto al proprio sistema sperimentale.
• A causa dell'espressione limitata della proteina negli ovociti e negli embrioni precoci, preparare lisati da campioni biologici appropriati e considerare strategie di arricchimento se si lavora con tessuti somatici.

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