Anticorpo policlonale anti-NME1/NM23A per WB, IF/ICC, ELISA - P15531

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NME1/NM23A

• NME1/NM23A, nota anche come nucleoside diphosphate kinase A (NDK A) o NM23-H1, è un membro onnipresentemente espresso della famiglia delle nucleoside diphosphate kinase ed è stata originariamente identificata come un inibitore delle metastasi.
• Attività nucleoside diphosphate kinase principale: catalizza il trasferimento del gruppo gamma-fosforile dall'ATP ai nucleoside difosfati (GDP, CDP, UDP, ecc.), mantenendo l'omeostasi dei nucleoside trifosfati; fosforila anche i pirofosfati geranile e farnesile, collegandosi al metabolismo degli isoprenoidi. Riferimenti correlati: PMID:10952986, PMID:14960567, PMID:16313181
• Sono state dimostrate funzioni chinasiche non specifiche aggiuntive, incluse le attività chinasi delle proteine serina/treonina e istidina, suggerendo ruoti nella trasduzione del segnale. Riferimenti correlati: PMID:8529641, PMID:9038158
• NME1 possiede attività nucleolitiche del DNA: agisce come endonucleasi a filamento singolo dipendente da Mg²⁺ all'interno del complesso SET, cooperando con TREX1 per mediare la frammentazione del DNA apoptotico, e funziona anche come esonucleasi DNA 3′‑5′. Riferimenti correlati: PMID:12628186, PMID:16818237, PMID:11694515, PMID:14960567, PMID:16313181
• Richiesto per la motilità cellulare e coinvolto nella regolazione delle metastasi tumorali e della differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:8270257, PMID:25582197
• Localizzazione subcellulare: trovata nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli aminoacidi 10‑110 di NME1 umana, una regione prevista essere accessibile e conservata; la reattività crociata con il ratto implica la conservazione dell'epitopo attraverso le specie.
• Per il western blot (WB), è prevista una banda di circa 17 kDa in condizioni riducenti; ottimizzare la diluzione dell'anticorpo (es. 1:500–1:2000) e i tempi di esposizione in base all'abbondanza del campione.
• IF/ICC potrebbe richiedere protocolli di permeabilizzazione per rilevare i pool nucleari e associati alla membrana; si consiglia la colorazione simultanea con marker specifici del compartimento.
• Gli saggi ELISA possono essere sviluppati utilizzando l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale corrispondente può aumentare la specificità per le applicazioni quantitative.
• Dato che NME1 è ampiamente espresso, utilizzare appropriati controlli positivi (es. HEK293, HeLa) e negativi (knockdown/knockout) per validare la specificità del segnale.

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