Anticorpo monoclonale di coniglio anti-NME1/NM23A per WB ed ELISA - P15531

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NME1/NM23A

• Chinasi A dei nucleosidi difosfato (NDK A/NM23-H1) è un membro della famiglia delle chinasi dei nucleosidi difosfato, codificata dal gene NME1, noto anche come NDPKA, NM23 e GAAD. È espressa ubiquitariamente nei tessuti umani e conservata tra le specie.
• Omeostasi fondamentale dei nucleosidi trifosfato: catalizza il trasferimento di un gruppo gamma-fosforile dall'ATP ai nucleosidi difosfato tramite un intermedio fosfoistidinico, mantenendo i pool cellulari di NTP. Fosforila inoltre il geranil pirofosfato (GPP) e il farnesil pirofosfato (FPP), collegandosi al metabolismo degli isoprenoidi. Riferimenti correlati: PMID:10952986, PMID:14960567, PMID:16313181
• Attività chinasiche aggiuntive: funziona come chinasi non specifica della serina/treonina e come chinasi proteica dell'istidina, trasferendo gruppi fosforile alle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:8529641, PMID:9038158
• Ruolo nella frammentazione del DNA e nell'apoptosi: come parte del complesso SET, NME1 agisce come endonucleasi del DNA a singolo filamento dipendente da Mg²⁺, cooperando con TREX1 per mediare la frammentazione apoptotica del DNA nei linfociti T citotossici. Incide un filamento del DNA, consentendo a TREX1 di processare l'estremità 3' libera e aumentando il danno al DNA. Può inoltre funzionare come esonucleasi del DNA 3'-5'. Riferimenti correlati: PMID:12628186, PMID:16818237, PMID:14960567, PMID:16313181
• Metastasi tumorale e motilità cellulare: è coinvolta nella regolazione della metastasi tumorale e della differenziazione cellulare ed è necessaria per la motilità cellulare. Può controllare, insieme a NME2, l'utilizzo del CoA acetilato tra l'acetilazione degli istoni e la sintesi degli acidi grassi nelle regioni della cromatina trascrizionalmente attive. Riferimenti correlati: PMID:8270257, PMID:25582197
• Localizzazione subcellulare: si trova nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare, in linea con le sue diverse funzioni nella segnalazione, nel metabolismo degli acidi nucleici e nei processi associati alla membrana.
• Modifiche post-traduzionali e parole chiave: la proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e glutationilazione e può formare ponti disolfuro. Le parole chiave ne evidenziano i ruoli nell'attività chinasica, nel metabolismo dei nucleotidi, nell'apoptosi e nella soppressione tumorale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1-100 di NME1 umano (P15531). L'anticorpo monoclonale di coniglio risultante è diretto contro la regione N-terminale, altamente conservata tra uomo, topo e ratto.
• Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali di linee cellulari umane, murine o di ratto; il peso della banda attesa è di circa 17 kDa in condizioni riducenti.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per saggi di legame diretto con la proteina NME1 ricombinante o con il peptide immunogeno; si raccomanda un'adeguata ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevazione.
• Sebbene la reattività crociata con topo e ratto sia stata confermata dal fornitore, è consigliabile validare le prestazioni nella matrice del campione e nel sistema sperimentale specifici.

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