Anticorpo policlonale anti-NMNAT1 per WB e ELISA - Q9HAN9

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di NMNAT1

• NMNAT1 (Nicotinamide/nicotinic acid mononucleotide adenylyltransferase 1) è noto anche come nicotinamide-nucleotide adenylyltransferase 1 e nicotinate-nucleotide adenylyltransferase 1. È un enzima chiave nella biosintesi del NAD+.
• Catalizza la conversione dipendente da ATP del mononucleotide di nicotinamide (NMN) e del mononucleotide di acido nicotinico (NaMN) in NAD+ e NaAD+, rispettivamente. Accetta anche il monofosfato di triazofurina come substrato e può eseguire la clivaggio pirofosforolitico inverso del NAD+. Riferimenti correlati: PMID:17402747
• Funziona nella generazione di ATP nucleare insieme a PARP1, PARG e NUDT5, fornendo energia per un esteso rimodellamento della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:27257257
• Agisce come cofattore che dirige l'attività catalitica di PARP1 verso i residui di glutammato e aspartato sugli istoni, influenzando l'ADP-ribosilazione.
• Si localizza prevalentemente nel nucleo.
• Ampiamente espresso con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, nel cuore e nel rene; trovato anche nel fegato, nel pancreas, nella placenta e in tutto il cervello.
• Protegge dalla degenerazione assonale a seguito di insulti meccanici o tossici, una funzione che potrebbe richiedere l'attività enzimatica ma non correla con i livelli cellulari di NAD+.
• Contiene un motivo di legame allo zinco e subisce fosforilazione, come indicato dagli studi di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-150) di NMNAT1 umano. Questa regione è probabilmente esposta e potrebbe riconoscere sia la forma a lunghezza intera che certe forme troncate. Considerare la verifica della specificità nel proprio sistema di campionamento.
• Consigliato per Western blot (WB) ed ELISA. Per il WB, è prevista una banda intorno a 32 kDa in lisati di origine umana. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento, poiché gli anticorpi policlonali potrebbero richiedere una titolazione.
• La reattività crociata è riportata per NMNAT1 umano. Se si lavora con altre specie, validare sperimentalmente la reattività crociata, in quanto non è garantita.
• A causa della localizzazione nucleare del bersaglio, considerare metodi appropriati di lisi e frazionamento per arricchire le proteine nucleari se il segnale è debole.

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